[发明专利]一种重组腺相关病毒及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及一种重组腺相关病毒及其应用。

背景技术

阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)是一种渐进性神经退行疾病，又称原发性老年痴呆症。AD的临床症状主要表现为渐进性记忆障碍、认知功能障碍和语言障碍等，是一种严重影响患病者社交与生活、给家庭和社会带来沉重负担的疾病。AD患者主要的病理特征为脑内观察到大量的老年斑(Senile plaque,SP)和神经纤维缠结(Neurofibrillary tangle,NFT)，相应地，AD病发目前最流行的是Aβ淀粉样蛋白级联假说和Tau蛋白异常磷酸化导致的神经纤维缠结假说。

根据上述发病机理假说，近年来研究者对AD开发出不少新的药物和治疗方法，目前临床上的治疗方法主要有：影响胆碱系统功能药物(包括胆碱酯酶抑制剂、Ach受体激动剂)；脑血循环改善剂；脑代谢激活剂；纠正钙稳态失调、抗氧化、抗炎药物；神经营养因子等。这些药物治疗机制不明确，也不确定是否产生确切疗效，一部分甚至有很大的毒副作用。此外，这些药物大多只能缓解AD的表面症状，不能防止AD的迅速发展。而某些在基础研究中表现出防治AD作用的药物，又因为不易透过血脑屏障而预测不到应用前景。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种重组腺相关病毒及其应用。

本发明是这样实现的，一种重组腺相关病毒，所述重组腺相关病毒由SelP-H 基因与腺病毒基因重组而成。

进一步地，所述腺病毒为9型重组腺相关病毒载体。

进一步地，所述重组腺相关病毒基因中携带有绿色荧光蛋白基因。

进一步地，所述重组腺相关病毒的碱基序列为如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供了上述所述的重组腺相关病毒的应用，所述应用为将所述重组腺相关病毒用于制备防治阿尔茨海默症的药物或保健品。

进一步地，所述药物或保健品中所述重组腺相关病毒的含量为500-2000PFU/mL。

进一步地，所述药物或保健品用于调控阿尔茨海默症患者脑内金属离子的浓度。

进一步地，所述金属离子包括Cu²⁺、Zn²⁺和Fe²⁺，所述Cu²⁺的浓度为200-400μmol/L，所述Zn²⁺的浓度为500-1500μmol/L，所述Fe²⁺的浓度为500-1500μmol/L。

本发明还提供了上述所述的重组腺相关病毒的应用，所述应用为将所述重组腺相关病毒用于制备调控动物脑内金属离子的含量的片剂、注射剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、微丸、散剂、滴丸剂、汤剂、糖浆剂、合剂、煎膏剂或浸膏剂剂型的药物或保健品。

本发明与现有技术相比，有益效果在于：本发明实施例提供的重组腺相关病毒，由SelP-H基因与腺病毒基因重组而成，所述重组腺相关病毒可在动物脑内特定区域稳定表达。重组腺相关病毒可以提高动物脑内尼氏小体的数量；降低患AD动物脑内GSK3β和磷酸化的蛋白水平，同时提高PP2A的表达量；提高神经突触相关蛋白的表达量。本发明实施例提供的重组腺相关病毒通过以上作用，起到调控脑内多种金属离子的含量和分布。

附图说明

图1是本发明实施例2提供的重组腺相关病毒在小鼠海马区的感染效果的结果示意图；

图2是本发明实施例3提供的Morris水迷宫检测的SelP-H对AD模型小鼠的空间探索和记忆能力的影响的结果示意图；

图3是本发明实施例4提供的以硫黄素T染色检测的SelP-H对AD模型小鼠脑内老年斑数量的影响的结果示意图；

图4是本发明实施例5提供的以尼氏染色检测的SelP-H对AD模型小鼠脑内神经元功能的影响的结果示意图；

图5是本发明实施例6提供的通过ICP-MS检测的SelP-H对AD模型小鼠脑内金属离子含量的影响的结果示意图，其中图5a是关于锌离子，图5b是关于铁离子，图5c是关于锰离子，图5d是关于钒离子。

图6是本发明实施例7提供的通过XRF检测SelP-H对AD模型小鼠脑内金属离子含量和分布的影响的结果示意图；