[发明专利]一种用于肺组织3D培养的培养基有效
申请号: | 201710183411.2 | 申请日: | 2017-03-24 |
公开(公告)号: | CN106834212B | 公开(公告)日: | 2021-02-09 |
发明(设计)人: | 陈崇;纳飞飞 | 申请(专利权)人: | 四川大学华西医院 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/09 |
代理公司: | 四川力久律师事务所 51221 | 代理人: | 熊晓果 |
地址: | 610041 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 组织 培养 培养基 | ||
本发明公开了一种3D培养人肺组织的培养基,所述述培养基含有以下成分:B27、N‑acetylcysteine、EGF、Noggin、R‑spondin 1、A83‑01、FGF10、Nicotinamide、Y‑27632*、WNT3a、Glutamax、N2、Gastin中的一种或多种。本发明的培养基营养成分适宜,肺组织及肺癌组织可以有效的维持组织细胞特异性、干细胞特性形成遗传及生物学功能稳定肺组织/肺癌组织类器官,满足科学研究需要。
技术领域
本发明属于生物医药领域,特别是用于人肺组织类器官3D培养的培养基,属于细胞培养的培养基材料。
背景技术
细胞培养技术是由一个或少量细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞的技术。细胞在体内环境中,由机体体液循环系统供给生存复制的能量和原料,当进行体外培养的时候,往往需要根据不同的细胞的生长特点配制具有针对性的营养基质。\
人源组织类器官(Organoids)培养技术作为近来肿瘤学研究的新手段,体外3D培养条件下使用成熟人体细胞培养人体组织类器官(organoid),这种类器官几乎保留了来源人体组织相同的遗传学特征,可在体外表现出与体内细胞相似的遗传物质以及结构的稳定性。目前,科学家已成功在体外使用成熟肝脏、小肠、消化道组织细胞培养出肝脏类器官、小肠类器官及食管类器官等,并利用这一技术在相关领域开展进行了多种研究。相对于传统的细胞培养,这一技术可以为我们提供充足的遗传稳定、均一的体外培养的组织细胞,并将可能对直接研究基因在人体细胞中的作用提供巨大的帮助。
现有技术中对于肺组织细胞的主要是普通的培养技术,在二维培养过程中肺组织细胞难以或不能充分的表达出肺组织的特性,使得培养的肺组织细胞和活体的肺组织细胞有所差异,不利于研究的进行。而在3D培养中,缺少必要的适宜的培养基的情况下,肺组织细胞的培养分化同样不利,难以充分模拟出体内的肺组织结构的生理特性。
虽然多种人源组织在不同的培养条件下可在体外成功培养类器官,但目前暂无关于肺组织及肺癌组织类器官培养方法的研究及报道,尤其是具体的培养条件即培养基质配方尚无尝试及报道。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中二维培养技术的肺组织细胞活性不佳,肺/肺癌组织细胞体外3D类器官培养缺少针对性培养基的问题,提供一种人肺/肺癌组织3D类器官培养的培养基。
为了实现上述发明目的,本发明提供了以下技术方案:
一种3D培养人肺/肺癌组织的培养基,所述述培养基含有以下成分:B27、N-acetylcysteine、EGF、Noggin、R-spondin 1、A83-01、FGF10、Nicotinamide、Y-27632*、WNT3a、Glutamax、N2、Gastin一种或几种。
进一步,所述培养基中至少含有FGF10,R-spondin1,Noggin,WNT3a,A83-01,B27/N2。
进一步,所述3D培养人肺组织的培养基,包括以下多种成分配制而成,
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