[发明专利]一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法

说明书

技术领域

本发明涉及灰树花生产领域，特别是一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法。

背景技术

灰树花(舞茸)多糖是灰树花中的一种提取物，由葡聚糖、葡萄糖、木糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、丰乳糖及少量蛋白质的异聚糖复合物组成。灰树花多糖中含有一种蛋白多糖，中文名叫舞茸地复仙（舞茸D-fraction）它的蛋白和多糖的比例是7：3平均分子量是100万。多糖部分由具有β-(1-3)侧链的β-(1-6)葡聚糖和具有β-(1-6)侧链的β-(1-3)葡聚糖组成。多糖成分中只有这种舞茸地复仙最有抗癌防癌的作用。

灰树花（Grifolafrondosa）是一种药食两用菌，其多糖是主要的一类活性成分，作为一种生物反应调节剂，灰树花多糖具有增强免疫功能、抑制肿瘤、抗HIV病毒、稳定血压、降低血糖、改善脂肪代谢等生理活性，且无毒副作用。热水浸提法是多糖提取最普遍应用的方法之一，但该方法存在耗时长，提取率不高等缺点，并存在很大程度的原料浪费。

发明内容

本发明对现有的灰树花多糖提取方法，进行了综合性研究，结合现有技术，针对热水浸提法存在的提取率不高、原料浪费严重的问题，公开了一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，本发明的灰树花多糖分离纯化方法，具有提取率高，原料利用率高的特点。

为解决以上技术问题，本发明提供的技术方案是:

一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）使用醇溶液对灰树花子实体原料进行浸泡脱脂，脱脂完毕后，通过离心设备，进行固液分离，得到一次固相物和一次提取液；

（2）使用去离子水对步骤 （1）中所得的一次固相物，进行沸水冷凝回流浸提，浸提完毕后，再次通过离心设备，进行固液分离，得到二次固相物和二次提取液；

（3）将步骤（2）中所得的二次提取液，经浓缩、去蛋白、碱中和、透析脱盐、醇沉、洗涤后，喷雾干燥，得灰树花水提多糖；

（4）使用碱性水溶液对步骤 （2）中所得的二次固相物进行浸提，浸提完毕后固液分离，得到三次提取液；

（5）将步骤（4）中所得的三次提取液，经酸中和、透析脱盐、醇沉、洗涤后，喷雾干燥，即得灰树花碱提多糖。

上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤（1） 中，所述醇溶液与灰树花子实体原料的重量比为 8-10 ：1，醇溶液为85－95%乙醇（w/v）溶液。

上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤 （2） 中，进行沸水冷凝回流浸提时，水体温度控制在90－100℃之间，煎煮时间控制在2－4小时。

上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤 （2） 中，所述离子水与灰树花原料的重量比为 8－10 ：1，提取次数共计2次。

上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤 （3）中，对二次提取液进行浓缩时，通过框架式薄膜浓缩器或真空浓缩机，进行浓缩，直至二次提取液的波美度达到25°～30°。

上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤 （3）中，去蛋白的具体条件为，向经过浓缩的二次提取液中，滴加5－30%三氯乙酸（w/v），直至溶液不再混浊，并于3－6℃下静置12－24小时，离心去蛋白。

上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤 （3）中，向经过去蛋白的二次提取液中，滴加10%氢氧化钠水溶液，进行中和，直至PH为6.8-7.2之间。

上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤 （3）和（5）中，进行透析脱盐时，透析袋埋在吸水力强的聚乙二醇或甘油中，分别对步骤（3）中经过碱中和的二次提取液和步骤（5）中经过酸中和的三次提取液，进行透析36－48小时。

上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤 （3）和（5）中，醇沉的具体步骤为：

A、冷却的步骤 （3）中的二次提取液和步骤 （5）中的三次提取液至10℃；

B、随后采用三慢二快的搅拌节奏，缓慢向二次提取液和三次提取液中加入乙醇，并控制二次提取液和三次提取液内的含醇量达54％～65％；

C、最后，将加入了乙醇的二次提取液和三次提取液密封，并保存于低温环境下，环境温度控制在5℃~10℃。

上述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其中，步骤 （3）和（5）中，进行洗涤时，通过无水乙醇和丙酮依次洗涤两次。