[发明专利]一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法

权利要求书

1.一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）使用醇溶液对灰树花子实体原料进行浸泡脱脂，脱脂完毕后，通过离心设备，进行固液分离，得到一次固相物和一次提取液；

（2）使用去离子水对步骤 （1）中所得的一次固相物，进行沸水冷凝回流浸提，浸提完毕后，再次通过离心设备，进行固液分离，得到二次固相物和二次提取液；

（3）将步骤（2）中所得的二次提取液，经浓缩、去蛋白、碱中和、透析脱盐、醇沉、洗涤后，喷雾干燥，得灰树花水提多糖；

（4）使用碱性水溶液对步骤 （2）中所得的二次固相物进行浸提，浸提完毕后固液分离，得到三次提取液；

（5）将步骤（4）中所得的三次提取液，经酸中和、透析脱盐、醇沉、洗涤后，喷雾干燥，即得灰树花碱提多糖；

其中，步骤（1） 中，所述醇溶液与灰树花子实体原料的重量比为 8-10 ：1，醇溶液为85－95%乙醇（w/v）溶液；

其中，步骤 （2） 中，进行沸水冷凝回流浸提时，水体温度控制在90－100℃之间，煎煮时间控制在2－4小时；

其中，步骤 （2） 中，所述离子水与灰树花原料的重量比为 8－10 ：1，提取次数共计2次；

其中，步骤 （3）中，对二次提取液进行浓缩时，通过框架式薄膜浓缩器或真空浓缩机，进行浓缩，直至二次提取液的波美度达到25°～30°；

其中，步骤 （3）中，去蛋白的具体条件为，向经过浓缩的二次提取液中，滴加5－30%三氯乙酸（w/v），直至溶液不再混浊，并于3－6℃下静置12－24小时，离心去蛋白。

2.如权利要求1所述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其特征在于，步骤 （3）中，向经过去蛋白的二次提取液中，滴加10%氢氧化钠水溶液，进行中和，直至PH为6.8-7.2之间。

3.如权利要求1所述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其特征在于，步骤 （3）和（5）中，进行透析脱盐时，透析袋埋在吸水力强的聚乙二醇或甘油中，分别对步骤（3）中经过碱中和的二次提取液和步骤（5）中经过酸中和的三次提取液，进行透析36－48小时。

4.如权利要求1所述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其特征在于，步骤 （3）和（5）中，醇沉的具体步骤为：

A、冷却步骤 （3）中的二次提取液和步骤 （5）中的三次提取液至10℃；

B、随后采用三慢二快的搅拌节奏，缓慢向二次提取液和三次提取液中加入乙醇，并控制二次提取液和三次提取液内的含醇量达54％～65％；

C、最后，将加入了乙醇的二次提取液和三次提取液密封，并保存于低温环境下，环境温度控制在5℃~10℃。

5.如权利要求1所述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其特征在于，步骤 （3）和（5）中，进行洗涤时，通过无水乙醇和丙酮依次洗涤两次。

6.如权利要求1所述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其特征在于，步骤（3）和步骤（5）中，进行喷雾干燥时，采用超声波喷雾干燥工艺，设定进风温度为85~95℃，进气压力设定为0.1~0.25MPa，进料量控制在30~50mL/min，同时设定出风温度为70~90℃。

7.如权利要求1所述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其特征在于，步骤 （4） 中，所述碱性水溶液与二次固相物的重量比为 8-10 ：1，碱性水溶液为5%氢氧化钠水溶液；步骤 （4） 中，进行浸提时，水体温度控制在90－100℃之间，煎煮时间控制在2－4 小时。

8.如权利要求1所述的一种灰树花水提多糖和碱提多糖分离纯化的方法，其特征在于，步骤（5） 中，进行酸中和时，通过向三次提取液中，滴加2mol/L HCL溶液进行中和，直至PH值为7.0。