[发明专利]可雾化吸入的抗流感病毒感染的siRNA及其应用

说明书

本发明公开了可雾化吸入的抗流感病毒感染的siRNA及其应用。该siRNA是名称为siPB2‑1、siPB2‑2、siPB1‑2或siNS‑1的双链RNA分子；siPB2‑1的一条链序列为序列表中SEQ ID No.1；siPB2‑2的一条链序列为序列表中SEQ ID No.3；siPB1‑2的一条链序列为序列表中SEQ ID No.5；siNS‑1的一条链序列为序列表中SEQ ID No.7。该siRNA的EC50和小鼠体内实验的用量小于文献报道，作为抗流感病毒药物将大大降低使用成本，不仅针对A型流感病毒，对于B型流感病毒同样具有抑制作用。

技术领域

本发明涉及医药生物技术领域中可雾化吸入的抗流感病毒感染的siRNA及其应用。

背景技术

流感病毒是引起人类急性呼吸道传染病最主要的病原，主要通过空气飞沫传播，具有传播速度快、发病率高和常常引发严重并发症等特点。流感每年在温带的秋冬季节大量流行，造成相当高的发病率和死亡率，严重威胁人类健康。据估计，全世界每年会有大约25万-50万人丧生于季节性流感。由于流感病毒可以在不同宿主之间直接或间接传播，容易发生基因重组产生新的亚型，可能会带来灾难性的后果，如人类历史上的几次流感大爆发，导致全球数百万人丧生。而2013年在我国出现的H7N9禽流感病毒更是以相当高的死亡率再次引起了对流感病毒高度的恐慌和关注。

流感病毒属于正粘病毒科，分为甲、乙、丙三型。其中，甲型流感病毒危害最大，至今为止的流感大流行都是由甲型流感病毒引发。甲型流感病毒基因组由8条单股负链RNA组成，可以在宿主体内转录形成互补的正链mRNA，分别编码病毒的各种结构蛋白和非结构蛋白。

目前流感的防治主要依靠药物以及疫苗。常见的药物有M2离子通道阻断剂(金刚烷胺和金刚乙胺)和NA抑制剂(扎那米韦和奥司他韦)，以及一些其他的新型药物；流感疫苗主要有三种类型：灭活疫苗，减毒活疫苗和DNA疫苗。但是由于药物频发的耐药性以及疫苗作用的局限性，使得药物和疫苗的研发成了一个永无止境的过程。因此，探寻一种新型，有效的流感防治方法迫在眉睫。

RNA干扰技术，作为一种新型的生物技术，已广泛应用于探索基因功能以及传染性疾病和恶性肿瘤的治疗，同时在抗病毒研究领域也体现出独特的优势。RNA干扰作用通过一类较稳定的作用分子实现，主要包括小干扰RNA(siRNAs)，核糖核酸酶Dicer，RNA诱导沉默复合体(RISC)。siRNA是大小约为21-25nt的双链RNA分子。RnaseⅢ型核酸酶Dicer具有解旋酶活性，含有dsRNA结合区，可以在细胞中将dsRNA裂解为siRNAs。RISC含Dcr-2蛋白，R2D2蛋白以及Argonaute蛋白。研究表明Argonaute家族蛋白具有RNA内切酶活性，RNAi机制正是由Argonaute家族蛋白的RNA内切酶活性主导。