[发明专利]一种中药红血藤的组培快繁方法

说明书

本发明涉及涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种中药红血藤的组培快繁方法，包括依次进行的如下步骤：获取红血藤的外植体、外植体的诱导培养、不定芽的增殖培养、不定芽的生根培养、试管苗移栽；所述的外植体的诱导培养的诱导培养基包括：MS培养基、1.0～3.0mg/L 6‑BA、0.1～0.3mg/L 2‑IP、20～30g/L蔗糖、3.5～4.0g/L琼脂、0.5～1.0g/L活性炭，pH为5.4～5.8，本发明的方法的中药红血藤试管苗移栽成活率达到95％以上。

技术领域

本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种中药红血藤的组培快繁方法。

背景技术

中药红血藤(Spatholobus sinensis)为豆科密花豆属植物，是正品鸡血藤的地区代用品，其富含红血藤苷、四羟基异黄酮、异甘草素、柚皮素和原儿茶酸等物质，具有补血、活血、舒筋活络的功效，临床用于治疗月经不调、血虚瘫痪、风湿痹痛等疾病。红血藤主要产于广西、广东、海南等地，常见于低海拔谷密林中。

红血藤与正品鸡血藤同属密花豆属，但至今未见对其组织培养研究的报道，因此有必要建立其组织培养技术体系。本发明选择红血藤带节茎段为外植体，经诱导、增殖、生根、炼苗以及移栽等步骤，建立了中药红血藤的组织培养技术体系。本发明具有操作性强、成本低廉、周期短等特点，可直接用于红血藤种苗的工厂化生产，对于促进正品鸡血藤代替品红血藤的资源开发具有重要的现实意义。

目前，国内外尚未有红血藤组织培养技术的报道，也未有红血藤组培快繁专利的申请。

发明内容

本发明的目的是提供一种中药红血藤的组培快繁方法，本发明选择红血藤带节茎段为外植体，经诱导、增殖、生根、炼苗以及移栽等步骤，建立了中药红血藤的组织培养技术体系，从而实现了本发明的目的。

本发明提供的技术方案为：一种中药红血藤的组培快繁方法，包括依次进行的如下步骤：获取红血藤的外植体、外植体的诱导培养、不定芽的增殖培养、不定芽的生根培养、试管苗移栽；

所述的外植体的诱导培养的诱导培养基包括：MS培养基、1.0～3.0mg/L 6-BA、0.1～0.3mg/L 2-IP、20～30g/L蔗糖、3.5～4.0g/L琼脂、0.5～1.0g/L活性炭，pH为5.4～5.8。

在上述的中药红血藤的组培快繁方法中，所述的外植体的诱导培养的方法为：将红血藤的外植体经清洗消毒处理后切成1.5～2.5cm的带节藤茎并接种到诱导培养基中，置于25～28℃进行全暗培养35～45天即可诱导形成不定芽。

在上述的中药红血藤的组培快繁方法中，不定芽的增殖培养所用的增殖培养基包括：MS培养基、1.0～3.0mg/L 6-BA、0.1～0.3mg/L IAA、20～30g/L蔗糖、3.5～4.0g/L琼脂、0.1～0.5g/L活性炭，pH为5.4～5.8。

在上述的中药红血藤的组培快繁方法中，所述的不定芽的增殖培养的方法具体为：将经过外植体的诱导培养得到的不定芽切成长1.0～1.5cm的茎段并接种到增殖培养基中培养30～35天即可实现不定芽的增殖。

在上述的中药红血藤的组培快繁方法中，不定芽的生根培养所用的生根培养基包括：1/2MS培养基、0.5～1.0mg/L ABT-1、0.05～0.1mg/L GA₃、15～20g/L蔗糖、3.0～4.0g/L琼脂、0.1～0.3g/L活性炭，pH为5.4～5.8。

在上述的中药红血藤的组培快繁方法中，所述的不定芽的生根培养的方法为：将经过不定芽的继代培养得到的长1.5～2.0cm的不定芽从基部切取并接种到生根培养基中培养25～30天即能实现试管苗的生根。