[发明专利]一种用于调高PTEN基因表达的多肽复合物的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于基因表达调控领域，具体涉及一种用于调高PTEN基因表达的多肽复合物的制备方法。

背景技术

PTEN是第一个同时兼具脂质和蛋白双特异性磷酸酶活性的抑癌基因，于1997年从人类第10q23.3染色体位点分离并得到，可参与细胞周期调控并抑制肿瘤细胞增殖及促进肿瘤细胞凋亡。在研究新的抗癌药物时，可以其是否可以调高PTEN的表达来进行。

目前，在研究可以调高PTEN表达的试剂或者组合物领域中，多直接将各组分直接进行混合，不仅效率较低，而且不利于实际应用。另一方面，据发明所知，目前尚未发现设计特定多肽来实现调控PTEN表达的报道。

发明内容

根据本领域的需求和现有技术的缺点和技术空白，本发明的目的在于提供一种用于调高PTEN基因表达的多肽复合物的制备方法，所述方法为：

（1）制备聚合物颗粒，所述聚合物为PLA或PCL；所述聚合物颗粒中包埋有质量分数为0.5-0.8%的雷公藤甲素；

（2）将步骤（1）所得颗粒与多肽混合，所述多肽的序列如SEQ ID NO.1所示；

所述颗粒的粒径为1-3μm，所述颗粒与多肽的质量比为1000-5000:1。

发明人发现，当将本发明所述的多肽与本发明所述聚合物颗粒混合时，可以显著的调高PTEN的表达。本发明所述聚合物颗粒中的雷公藤甲素可以缓慢的释放，且包埋量仅需0.5-0.8 %。

值得说明的是，本发明所用的聚合物具有很好生物相容性，所制备得到的复合物可以直接注射至肿瘤部位。

发明人还发现，当不包埋雷公藤甲素时，对PETN几乎不产生调控作用。其中的机制还需进一步的研究。

优选的，步骤（1）中，雷公藤甲素的质量分数为0.55 %。

优选的，所述颗粒与多肽的质量比为2000-4000:1。更优选的，所述颗粒与多肽的质量比为3500:1。

所述聚合物为聚乳酸（PLA）。优选的，所述PLA的分子量为5000-8000。更优选的，所述PLA的分子量为6000。当PLA的分子量如上述范围时，在制备颗粒时较为容易且粒径较为可控；当分子量为6000时最好。

本发明的有益效果：

1、本发明可以显著的调高PTEN的表达，可以有效的实现抑瘤效果；

2、本发明对药物的使用量很小，可大幅度的降低药物的相关副作用。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明进行具体描述，有必要在此指出的是以下实施例只是用于对本发明进行进一步的说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员根据上述发明内容所做出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。

实施例1

（1）制备聚合物颗粒，所述聚合物为PLA（分子量为6000）；所述聚合物颗粒中包埋有质量分数为0.55%的雷公藤甲素；

（2）将步骤（1）所得颗粒与多肽混合，所述多肽的序列如SEQ ID NO.1所示；

所述颗粒的粒径为1-3μm，所述颗粒与多肽的质量比为3500:1。

实施例2

（1）制备聚合物颗粒，所述聚合物为PLA（分子量为5000）；所述聚合物颗粒中包埋有质量分数为0.8%的雷公藤甲素；

（2）将步骤（1）所得颗粒与多肽混合，所述多肽的序列如SEQ ID NO.1所示；

所述颗粒的粒径为1-3μm，所述颗粒与多肽的质量比为5000:1。

实施例3

（1）制备聚合物颗粒，所述聚合物为PLA（分子量为8000）；所述聚合物颗粒中包埋有质量分数为0.5%的雷公藤甲素；

（2）将步骤（1）所得颗粒与多肽混合，所述多肽的序列如SEQ ID NO.1所示；

所述颗粒的粒径为1-3μm，所述颗粒与多肽的质量比为1000:1。

实施例4

（1）制备聚合物颗粒，所述聚合物为PCL（分子量为5000）；所述聚合物颗粒中包埋有质量分数为0.6%的雷公藤甲素；

（2）将步骤（1）所得颗粒与多肽混合，所述多肽的序列如SEQ ID NO.1所示；

所述颗粒的粒径为1-3μm，所述颗粒与多肽的质量比为3000:1。

实验例