[发明专利]基于抗c-Myc标签纳米抗体的亲和吸附材料有效
| 申请号： | 201710100010.6 | 申请日： | 2017-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN106890622B | 公开（公告）日： | 2020-01-03 |
| 发明（设计）人： | 付金衡;涂追;许杨;陶勇;王丹;万清荣;曾庆虹 | 申请（专利权）人： | 南昌大佳科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18 |
| 代理公司： | 36135 南昌大牛专利代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 喻莎 |
| 地址： | 330096 江西省南昌市高*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 myc 标签 纳米 抗体 亲和 吸附 材料 | ||
1.一种c-Myc标签免疫亲和吸附材料，包括载体，搭载在载体上的配基，其特征在于该材料以特异性识别c-Myc标签的单域重链抗体作为配基，所述特异性识别c-Myc标签的单域重链抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO .:1所示的氨基酸序列；
所述的c-Myc标签免疫亲和吸附材料，载体为磁珠，制备方法为：取1mg羧基磁珠于离心管中，加入600～1000μl活化缓冲液10mM，NaH2PO4 ，pH为6.0，涡旋混合均匀，磁力架回收磁珠，再用活化缓冲液洗涤2遍,分别加入1～5mg碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，涡旋混合后，静置35min，用偶联缓冲液10mM，Na2HPO4 ，pH7 .4，洗涤磁珠5遍，加入抗c-Myc标签单域重链抗体，室温反应3～5h，得到共价偶联了抗c-Myc标签单域重链抗体的免疫磁珠。
2.根据权利要求1所述的c-Myc标签免疫亲和吸附材料，其特征在于所述载体为琼脂糖微球，所述载体为琼脂糖凝胶微球时，制备方法为：将CNBr活化的干胶用0.1M HCl洗涤10～20次，每次平衡6～10min， 用偶联缓冲液10mM，Na2HPO4 ，pH 7.2洗涤5～20次，加入抗c-Myc标签单域重链抗体，室温反应3～10h，得到共价偶联了抗c-Myc标签单域重链抗体的免疫亲和吸附材料。
3.根据权利要求1所述的c-Myc标签免疫亲和吸附材料，其特征在于，所述载体为硅胶微球，所述载体为硅胶微球时，制备方法为：将硅胶微球用纯水和磷酸缓冲液PBS，10mM，pH6.5交替洗涤5～15次，用PBS缓冲液悬浮硅胶微球，加入抗c-Myc标签单域重链抗体，混匀，加入终浓度1～10mg/ml的碳二亚胺(EDC)，迅速混匀，4℃搅拌反应12～20h，得到共价偶联了抗c-Myc标签单域重链抗体的免疫亲和吸附材料。
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