[发明专利]一种岩生忍冬总皂苷提取方法

说明书

本发明公开了一种岩生忍冬总皂苷提取方法，所述岩生忍冬总皂苷提取方法乙醇回流提取的最优条件为：80％乙醇，料液比为1:14，70℃下回流105min。本发明缩短单次回流时间，增加回流次数，可能进一步增加提取率，还需要进一步的研究。现在很多人选择乙醇回流提取后样品直接通过大孔树脂纯化与富集中药成分；考虑到药液浓度可能比较高，先进行萃取，除去了部分脂溶性物质和其他一些杂质，有助于提高大孔树脂吸附率。现在大部分试验选择应用于提取植物中皂苷成分的AB‑8大孔树脂。从MIC试验中可看出岩生忍冬中的皂苷成分对14种标准菌株均具有一定的抑菌活性，具有进一步研究的价值。

技术领域

本发明属于总皂苷提取技术领域，尤其涉及一种岩生忍冬总皂苷提取方法。

背景技术

岩生忍冬(Lonicera rupicola Hook.f.et Thomson.)为忍冬科忍冬属常绿藤木植物。主要分布于甘肃(临潭)、宁夏南部、四川西部、云南西北部、西藏(林芝、错那)。生于高山灌丛草甸、流石滩边缘、林缘河滩草地或山坡灌丛中，。味淡，微甘，性寒。清热解毒，疏风通络。用于温病发热，热毒血痢，痈肿疮疡，风湿热痹，关节红肿热痛。以其茎、叶、花入药，具有清热解毒、抗菌消炎、保肝利胆等功效。皂苷是一类由糖体和苷元缩合而成的结构复杂的化合物。传统定义皂苷基于它们的表面活性，许多皂苷具有洗涤作用，其水溶液振摇能产生大量持久性肥皂样泡沫。皂苷化合物通常分子量较大，极性也大。总皂苷为结构极为相似的类似物，如糖的种类、苷元均相同，只是糖连接的位置和次序不同。近十年来从天然资源中发现的皂苷中约有310余种显示出多种生物活性，如抗真菌、抗病毒、抗肿瘤、抗炎、免疫调节、保肝活性等。

综上所述，皂苷化合物通常分子量较大，极性也大，难以提取。

发明内容

本发明的目的在于提供一种岩生忍冬总皂苷提取方法，旨在解决皂苷化合物通常分子量较大，极性也大，难以提取的问题。

本发明是这样实现的，一种岩生忍冬总皂苷提取方法，所述岩生忍冬总皂苷提取方法乙醇回流提取的最优条件为：80％乙醇，料液比为1:14，70℃下回流105min。

进一步，所述岩生忍冬总皂苷对维氏气单胞菌CGMCC3700株抑菌活性最高，MIC值为0.48mg/mL；对其余肠沙门氏菌肠亚种CGMCC1.10754和大肠杆菌ATCC25922等13种标准菌株的MIC值分布在7.6875mg/mL-61.5mg/mL之间。

本发明提供的岩生忍冬总皂苷提取方法，由MIC试验结果可知岩生忍冬总皂苷对本次试验中的致病菌都具有一定程度的抑制能力。其中，对总皂苷最为敏感的菌株为维氏气单胞菌CGMCC3700株，浓度为0.246g/mL的总皂苷浸膏溶液在稀释倍数为512倍时，即浓度为0.48mg/mL的时候仍对其具有抑制生长的能力。除了维氏气单胞菌CGMCC3700株，总皂苷对其余几种菌株的MIC值都在稀释倍数为4-32倍之间，即药物浓度在7.6875mg/mL-61.5mg/mL之间。

试验得出最佳提取条件中提取时间为105min，本试验设计并没有涉及到时间低于105min时的提取率。可能当温度低于105min时存在更优的条件。本试验正交设计法设计影响总皂苷提取率的实验因素时没有设置回流次数这一因素。缩短单次回流时间，增加回流次数，可能进一步增加提取率，还需要进一步的研究。现在很多人选择乙醇回流提取后样品直接通过大孔树脂纯化与富集中药成分。本试验考虑到药液浓度可能比较高，先进行萃取，除去了部分脂溶性物质和其他一些杂质，有助于提高大孔树脂吸附率。现在大部分试验选择应用于提取植物中皂苷成分的AB-8大孔树脂。

随着抗生素的应用不断增多，兽医临床中耐抗生素药物的致病菌株不断增加。传统中兽医中，忍冬历来就被用于清热解毒，民间更是有夏季直接将忍冬藤泡水饮用的习惯。从MIC试验中可看出岩生忍冬中的皂苷成分对14种标准菌株均具有一定的抑菌活性，对岩生忍冬在川西北畜禽疾病防控具有进一步研究的价值。

具体实施方式