[发明专利]丙泊酚中/长链脂肪乳注射液包封率的检测方法

说明书

本发明提供一种测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液包封率的方法。本发明提供的方法采用超滤离心与高效液相色谱检测相结合来测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液的包封率，特别适用于丙泊酚中/长链脂肪乳注射液。该方法还具有重现性好、准确性好、可验证、耗时短、实验成本低的优点，能够更加真实准确的反应出丙泊酚中/长链脂肪乳注射液实际的包封情况。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体而言，涉及丙泊酚中/长链脂肪乳注射液包封率的检测方法。

背景技术

丙泊酚中/长链脂肪乳注射液为我公司开发的脂肪乳制剂，原研为德国费森尤斯卡比(fresenius kabi)公司，其产品2007年在我国上市，商品名竟安，为静脉注射用麻醉剂。制剂开发中为了获得与原研一致的药效、安全性及制剂特性，我们选择乳剂的粒径、粒径分布、包封率、外观状态作为考察指标，来筛选处方。在这些指标中，反映药物包封程度的包封率是微乳注射剂重要的质量指标，其检测方法的建立，也是研究工作中的难点，包封率的测定方法一般是先用一定的方法把未包封的游离药物与包封药物分离开并进行测定，根据总投药量计算得出，中国药典规定包封率一般不得低于80％。常用的测定方法包括葡聚糖凝胶法(分子筛法)、超滤膜过滤法、超速离心法、微型柱离心法和透析法等。我们参考相关文献，尝试了透析法、葡聚糖凝胶法等方案，均未能成功的测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液的包封率。在透析法中，要求药物具有一定的溶解度，且不受乳剂基质干扰，游离药物可在适宜的时间内顺利通过透析袋，且不导致包裹物渗漏，但事实上此法费时，一般室温条件下，要除去95％以上的游离药物至少需要更换三次渗析介质，时间在10－24h以上。在实际操作中，我们也遇到了渗析时间长，且无法获得稳定的释药平台的问题。而葡聚糖凝胶法，通常难以证明被包封脂肪乳与未包封游离药物已得到充分且完全的分离，即所测包封率结果可能高于或低于实际真实结果。在我们的实践中，所优选的体系，完全无法分离游离药物与包封药物，包封率结果为100％。

本发明是我们通过实践，探索到的唯一可将包封药物与游离药物进行区分的可操作性方法。它的原理是基于丙泊酚微乳溶液中，被包封药物与游离药物粒径的区别，通过超滤离心的方法，对包封药物进行分离，然后根据总投料量进行计算的方法。方法经实践与工艺验证，具有操作简单、数据可靠，区分度好的特点。

发明内容

本发明的目的是提供一种方法简单、可操作性强的检测药物包封率的方法，以克服现有脂肪乳制剂包封率测定中普遍存在的对药物选择性高、操作繁琐、重复性差等问题。

为了达到上述的目的，本发明提供一种测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液的药物包封率的方法，所述方法采用超滤离心与高效液相色谱检测相结合来测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液的包封率。

本发明提供的测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液包封率的方法，其包括以下步骤：

1)采用超滤离心系统分离出丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中的被包封部分；

2)采用高效液相色谱系统测定步骤1)中所分离出的被包封部分中的丙泊酚浓度，记为C；

3)采用高效液相色谱系统测定与步骤1)等量丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中的丙泊酚浓度，记为C₀；

4)按以下公式计算包封率：包封率＝C/C₀×100％。

优选地，所述步骤1)中采用超滤离心系统分离丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中的被包封部分时以水为溶剂；所述的超滤离心系统采用的超滤管为Millipore AmiconUltra-4Ultracel-100k；所述丙泊酚中/长链脂肪乳注射液的体积为10～2000μL。

更优选地，本发明所述测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液包封率的方法包括以下步骤：

1)采用超滤离心系统分离10～2000μL的丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中的被包封部分；