[发明专利]一种马铃薯茎尖培养基、制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养技术的再生领域，具体涉及到一种马铃薯茎尖培养基、制备方法及其应用。

背景技术

由于环境的污染或是病毒代代的累积，现在的植物中已经沉积了大量的病毒，导致植物病变影响产品的质量与数量；若是食用性植物，将严重影响人们的健康，其中，属于无性繁殖的植物，在生长过程中极易受到病毒的感染，例如，侵染马铃薯病毒多达30多种，而且随着时间的推移，植物一代一代的遗传，侵染马铃薯病毒种类会越来越多，现在马铃薯病毒已经成为全球普遍性的问题，严重影响农业的发展。

目前，人们通用的化学类药剂仅仅对细菌或真菌导致的病害有效，但是对病毒浸染的植物作用极小，因此，培养无病毒植物苗具有重要的现实意义和应用价值。常用的防治病毒方法为物理法，即通过X射线、紫外线和高温等进行处理，达到钝化病毒的目的，但是，物理法在防治病毒中属于小概率杀毒，而且同时也对植株造成了伤害，例如：基因突变或是组织受损等。还有化学法杀毒，使用抑制病毒复制的药物进行杀毒，但是同时会对寄主组织造成了伤害，推广性差。工业中常用的方法为生物学方法，即对种子、愈伤组织或是茎尖进行培养，但是种子培养只针对有性繁殖有效，愈伤组织培养易变异，因此，常用的手段为茎尖脱毒培养，而且周期短、成活率高等优点。

茎尖培养的脱毒原理是由于茎尖是新生长组织，或是激素含量的不同，导致病毒感染的几率小，含量低，因此，茎尖培养已经成为解决马铃薯病毒的主要途径，但是，茎尖培养技术需要进一步改进。

公开号为105532479A的中国专利公开了一种马铃薯茎尖分化培养基及制备方法。所述培养基的配方中含有L-半胱胺酸盐酸盐，以1L培养基计算，所述L-半胱胺酸盐酸盐的含量为0.1mg。所述配方为①或②，①：MS培养基+吲哚乙酸0.1mg/L+6-苄基嘌呤0.1mg/L+赤霉酸0.1mg/L+L-半胱胺酸盐酸盐0.1mg/L+30g/L蔗糖+5-7g/L琼脂粉；②：MS培养基+NAA 0.1mg/L+6-苄基嘌呤0.1mg/L+赤霉酸0.1mg/L+L-半胱胺酸盐酸盐0.1mg/L+30g/L蔗糖+5-7g/L琼脂粉。该发明在马铃薯组培用培养基(MS培养基)中添加L-半胱氨酸盐酸盐，作为抗氧剂，减少褐化现象，以增加马铃薯茎尖分生组织的成苗率。但是在茎尖培养过程中使用1个浓度的MS培养基铵态氮含量过高，而且还加入了其他营养物质，会使茎尖培养中生长速度慢，而且L-半胱氨酸盐酸盐在光照条件下易分解，破坏培养基的电解质平衡，不仅如此，分解产生的物质不确定，可能会影响植物的发育。

发明内容

为了进一步改进现有技术，促进茎尖培养的生长速度与出苗率，本发明公开了一种马铃薯茎尖培养基及其应用。本发明是对MS培养基的进一步改良，使之更适应马铃薯茎尖的培养。

本发明技术方案如下所示：

一种马铃薯茎尖培养基，所述的培养基配方为：0.8MS培养基、150-250mg/L KNO₃、40-100mg/L Ca(H₂PO₄)₂·H₂O、0.1-0.3mg/L龙葵碱、0.2-0.4mg/L吲哚乙酸、0.2-0.5mg/L 6-苄基嘌呤、0.05-0.2mg/L赤霉酸、0.5-1mg/L谷胱甘肽、25-35g/L蔗糖和8-10g/L琼脂。。

进一步的，所述的培养基配方为：0.8MS培养基、210mg/L KNO₃、65mg/L Ca(H₂PO₄)₂·H₂O、0.15mg/L龙葵碱、0.3mg/L吲哚乙酸、0.3mg/L 6-苄基嘌呤、0.12mg/L赤霉酸、0.7mg/L谷胱甘肽、32g/L蔗糖和9g/L琼脂。