[发明专利]高亲和力、高特异性、多抗原识别表位的具有更高功能性的抗人CTLA4抗体

说明书

本发明公开一种高亲和力、高特异性、多抗原识别表位的具有更高功能性的抗人CTLA4抗体。本发明的CTLA4单克隆抗体能够特异性的与CTLA4结合，并且能够有效的阻断CTLA4与B7蛋白的结合，特异地解除CTLA4的免疫负调节，激活T细胞分泌细胞因子。上述功能均达到或超过目前市场上的唯一CTLA4靶向药物Yervoy的水准,并且有部分抗体不同于Yervoy的抗原表位，具有更大的多样性。

技术领域

本发明属于肿瘤免疫疗法和分子免疫学领域，具体涉及一种高亲和力、高特异性、多抗原识别表位的具有更高功能性的抗人CTLA4抗体。

背景技术

脊椎动物的免疫系统是一个多层次，由多种器官、组织、细胞和分子组成的功能性系统，用来保护机体免受外来侵染和维护内平衡(Janeway et al.,Immunology:TheImmune System in Health and Disease.New York:Garland Science,2005)。它包括天然免疫系统和获得性免疫系统。其中，获得性免疫系统是由高度专业的T细胞和B细胞，以及多种效应分子组成，能够特异性识别包括细菌、真菌、病毒等在内的病原体并清除它们。获得性免疫系统由体液免疫(B细胞介导)和细胞免疫(T细胞介导)组成。其中，细胞免疫是通过T细胞受体(TCR)识别抗原呈递细胞(APC)上主要组织相容性复合体(MHC)呈递的抗原来引起的。

T细胞激活需要两级信号。第一级信号，也称为主要刺激信号，是通过TCR识别特异性MHC呈递的抗原来实现的。这种信号是抗原特异性的。激活T细胞的第二级刺激信号，也称为共刺激信号，是通过由表达在APC上的B7家族成员B7.1(也称为CD80)和B7.2(也称为CD86)，与表达在T细胞上的CD28结合时传递并导致T细胞激活的。CD28是免疫球蛋白(Ig)超家族的，由两条同源的具有胞外可变区的多肽组成，表达在T细胞表面，通过与B7蛋白结合传递T细胞激活的第二信号。如果没有CD28介导的第二信号，而只有TCR介导的第一信号，T细胞就会变得无能(anergic)。

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)(又称为CD152)，是T细胞上的一种跨膜抗体，表达在激活的T细胞上，发现于1987年(Brunet et al.,Nature 328:267-270,1987)。CTLA4与CD28同是Ig超家族成员，有单个胞外Ig结构域，而且CTLA4与CD28一样，也结合表达在APC表面的B7蛋白。但CTLA4的作用主要是通过结合B7蛋白，从而抑制T细胞激活达到控制内平衡，对免疫系统进行负调节。并且，由于CTLA4与B7蛋白的结合比CD28与B7蛋白的结合有更高的亲和力，这种机制可以在T细胞激活后，诱导T细胞凋亡，从而维持体内T细胞稳态，发挥免疫负调控功能。