[发明专利]一种聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物中间体的分析检测方法

说明书

本发明涉及一种聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物中间体的分析检测方法，用于聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物中间体的质量控制，是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱(C18，2.1×150mm，1.7μm)，以三氟乙酸水溶液和四氢呋喃为流动相A，以三氟乙酸乙腈和四氢呋喃为流动相B，梯度洗脱，以检测波长为214nm，进行高效液相色谱法分析检测。本发明的分析检测方法可以有效的将聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物中间体及其杂质分开，而且该方法具有线性关系良好，操作简单，重复性及耐用性好，结果稳定可靠的优点。

技术领域

本发明涉及一种高效液相色谱分析方法，尤其是一种聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物中间体的分析检测方法。

背景技术

聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物属于长效型GLP-1类似物，用于治疗人2型糖尿病。该药物以已上市GLP-1类似物Byetta结构为基础，通过不同序列比对和计算机模拟，化学合成不同氨基酸序列的Byetta类似物多肽，利用体外活性比较和稳定性考察等方法筛选得到了一种最优的促胰岛素分泌肽类似物氨基酸序列多肽。该多肽具有较优的与胰岛β细胞的亲和性、稳定性和体内外生物活性。

聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物中间体的化学式为C₁₇₂H₂₆₅N₄₉O₅₈S₂，氨基酸序列为：HGEGTFTSDL SKQMEEEAVR LFIEWLKNGG PGGSGGSC。

到目前为止，国内外药典和文献中均没有记载聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物中间体的分析检测方法，但聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物中间体的分析检测对反应控制和收率提高有着重要的作用，同时也直接影响着产品质量，所以建立一种稳定有效的分析检测方法对聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物中间体进行质量控制是非常必要的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物中间体的高效液相色谱分析检测方法，用于聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物中间体的质量控制。

为了实现本发明的目的，发明人通过大量试验，最终获得如下技术方案：

一种聚乙二醇化促胰岛素分泌肽类似物中间体的分析检测方法，是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱(C18，2.1×150mm，1.7μm)，以0.05～0.1％三氟乙酸水溶液-四氢呋喃(9:1)为流动相A，以0.05～0.1％三氟乙酸乙腈溶液-四氢呋喃(9:1)为流动相B；以检测波长为214nm，进行高效液相色谱法分析检测，执行梯度洗脱程序，设置如下：

进一步地，流动相优选为：以0.05％三氟乙酸水溶液-四氢呋喃(9:1)为流动相A，以0.05％三氟乙酸乙腈溶液-四氢呋喃(9:1)为流动相B。

所述的梯度洗脱程序优选为：