[发明专利]一种升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品的制备方法

权利要求书

1.一种升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品的制备方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：

(i) 提供升麻素苷半成品和5-O-甲基维斯阿米醇苷的半成品；

(ii) 将所述升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的半成品分别用50%甲醇水溶解，并利用中压制备柱分离，从而分别获得升麻素苷粗品和5-O-甲基维斯阿米醇苷粗品；其中，所述的中压制备柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶，且所述分离包括步骤：

(ii-1) 以体积比30-35%的甲醇溶液作为中压制备柱的第一洗脱剂，进行第一阶段洗脱，浓缩洗脱液以获得升麻素苷粗品；和

(ii-2) 以体积比45-50%的甲醇溶液作为中压制备柱的第二洗脱剂，进行第二阶段洗脱，浓缩洗脱液以获得5-O-甲基维斯阿米醇苷粗品；和

(iii) 利用溶剂对升麻素苷粗品和/或5-O-甲基维斯阿米醇苷粗品进行重结晶，从而获得升麻素苷对照品和/或5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品；

其中, 所述的升麻素苷半成品和5-O-甲基维斯阿米醇苷的半成品由包括以下步骤的方法制备得到：

(i-1) 混合防风药材和乙醇溶液，冷浸醇提，固液分离后浓缩液体部分，从而获得第一浓缩液，其中，所述的乙醇溶液的体积百分比浓度为80%；

(i-2) 使用大孔树脂吸附所述的第一浓缩液，然后分别用4-5倍柱体积的水洗脱杂质，再用1-2倍柱体积的55-65%乙醇溶液洗脱目标物，收集洗脱液，浓缩以获得第二浓缩液；和

(i-3) 使用硅胶柱层析分离所述的第二浓缩液，采用二氯甲烷:甲醇洗脱剂，并按10:1-5:1的体积比由高到低梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩以获得步骤(i)中所述的升麻素苷半成品和5-O-甲基维斯阿米醇苷的半成品

并且, 所述步骤(iii)还包括步骤：

(iii-1) 所述的升麻素苷粗品与纯水以及丙酮混合，使所述的升麻素苷粗品在混合溶剂中进行重结晶；

分离并干燥所得结晶物，即获得升麻素苷对照品；和

(iii-2) 所述的5-O-甲基维斯阿米醇苷粗品与甲醇以及丙酮混合，使所述的5-O-甲基维斯阿米醇苷粗品在混合溶剂中进行重结晶；

分离并干燥所得结晶物，即获得5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品;

并且，所述的升麻素苷对照品纯度≥99.0%，且所述的5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品纯度≥99.0%。

2.如权利要求1中所述的方法，其特征在于，所述步骤(ii)中的中压制备柱设有柱压0-2MPa。

3.如权利要求1中所述的方法，其特征在于，所述步骤(ii)中的中压制备柱设有柱压0.5-2MPa。

4.如权利要求1中所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(iii-2)在所述步骤(iii-1)之前，或同步进行。

5.如权利要求1中所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(iii-1)中，加入的丙酮的体积为纯水的5-10倍量；和/或

所述的步骤(iii-2)中，加入的丙酮的体积为甲醇的5-10倍量。

6.如权利要求1中所述的制备方法，其特征在于，所述的升麻素苷对照品纯度≥99.3%。

7.如权利要求1中所述的制备方法，其特征在于，所述的升麻素苷对照品纯度≥99.5%。

8.如权利要求1中所述的制备方法，其特征在于，所述的5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品纯度≥99.5%。

9.如权利要求1中所述的制备方法，其特征在于，所述的5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品纯度≥99.6%。