[发明专利]布鲁氏菌病CF-ELISA抗体检测试剂盒

权利要求书

1.一种布鲁氏菌病抗体检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含布脂多糖LPS抗原包被板、豚鼠补体、酶标记的豚鼠补体C1q-B单克隆抗体60G4，所述豚鼠补体C1q-B单克隆抗体60G4是由豚鼠补体C1q-b单抗60G4细胞株制备的，所述60G4细胞株已于2015年9月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC N0.11186；

所述抗原包被板的抗原是由布鲁氏菌S2菌株提取纯化的脂多糖LPS，所述布鲁氏菌S2菌株于2015年9月8日保藏中国兽医微生物菌种保藏中心，保藏编号为CVCC70512；

所述试剂盒还包括强阳性对照血清、弱阳性对照血清、阴性对照血清、底物显色液、终止液、洗涤液；

所述底物显色液为双组份TMB，所述终止液为稀硫酸，所述洗涤液为20倍浓缩的PBS-Tween洗涤液。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述酶标记的补体C1q-B单克隆抗体60G4中的酶为辣根过氧化物酶HRP。

3.根据权利要求1或2任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述豚鼠补体C1q-B单克隆抗体60G4腹水效价≥1:200，OD_450nm值≥2.00。

4.根据权利要求1或2任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述豚鼠补体效价为1:15倍稀释，OD_450nm值≥1.00。

5.根据权利要求1或2任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述强阳性对照血清浓度为50IU/ml，所述弱阳性对照血清浓度为25IU/ml。

6.根据权利要求1或2任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述抗原包被板的包被方法为：

布鲁氏菌S2株LPS抗原用0.05mo1/L碳酸盐缓冲液稀释，加入到酶标板，每孔100μl，2～8℃包被18小时以上，弃去孔中的抗原包被液，加入0.01mo1/L磷酸盐-吐温缓冲液洗涤酶标板4次，弃去洗涤液，用3％BSA或其它ELISA用封闭剂200μL/孔在2～8℃封闭18小时以上，用0.01mo1/L磷酸盐-吐温缓冲液洗板4次，弃去洗涤液后37℃干燥2h，加干燥剂一起放入锡箔袋中，抽真空密封。

7.权利要求1或2任一项所述的试剂盒的使用方法，其特征在于，在抗原包被板上加入被检测的动物血清样品和对照血清，再加入豚鼠补体进行补体结合反应，然后加入酶标记的豚鼠补体C1q-B单克隆抗体，再加入底物显色液进行显色，加入终止液后测定OD值。