[发明专利]一种多肽作为B细胞表位或肽半抗原的免疫刺激物构成多肽免疫原及其用途

说明书

本发明提供了一种含T辅助细胞表位(Th表位)的多肽可作为B细胞表位或肽半抗原的免疫刺激物构成多肽免疫原及其用途。将B细胞表位或肽半抗原通过连接肽和多肽共价连接，形成多肽免疫原，经小鼠多次筛选分析，获得含该多肽的多肽免疫原，能显著增强B细胞表位或肽半抗原的免疫原性，产生与目标抗原蛋白特异结合的抗体，显著增强偏向Th2的免疫调节，改善病症。同时本发明提供的多肽及含该多肽的免疫原及衍生物和类似物也可以用于重组微生物和能转基因的动物或植物及细胞，使它们作为生产工厂，能生产疫苗或制作口服疫苗或生产特异抗体及衍生物和改造物，用于防治Th1占优势的疾病包括但不限于糖尿病及并发症、类风湿性关节炎等和用于开发检测试剂。

技术领域

本发明涉及一种含T辅助细胞表位(Th表位)的多肽及其应用，尤其是此多肽用于和B细胞表位或肽半抗原---一种目标抗原蛋白的目标抗原位点共价连接成为新型多肽免疫原，可以作为B细胞表位或肽半抗原的免疫刺激物，增强目标抗原位点(B细胞表位或肽半抗原)的免疫原性并可用于制备特异的与含B细胞表位或肽免疫原的目标抗原蛋白结合的抗体，含有该多肽的新型多肽免疫原及偶联蛋白和融合蛋白以及基于其生产的特异抗体以及含有该多肽的衍生物和类似物及其基础上产生的特异抗体和抗体衍生物和类似物的药物及制剂，在预防和治疗Th1占优势诱导的疾病等方面具有重要应用价值，特异抗体及其衍生物和类似物可检测相关目标抗原蛋白，开发为检测试剂。本发明涉及免疫学、药学及医学相关领域。

背景技术

人类和动物同样存在两个辅助性T淋巴细胞亚群，Th1细胞主要产生Th1类细胞因子IL-2、TNF-β和IFN-γ；Th2细胞主要产生IL-4、IL-5、IL-6、IL-10和IL-13。正常情况下，辅助性T淋巴细胞亚群Th1/Th2细胞处于平衡状态，但机体发生功能异常时，常表现出平衡偏向其中一方，此即为″Th1/Th2平衡漂移″。习惯上把Th1及其细胞因子占优势的状态称为Th1状态，Th2及其细胞因子占优势的状态称为Th2状态。Th1/Th2平衡影响细胞因子网络的平衡，与许多疾病的发生、发展、治疗、转归有密切的关系，不同的自身免疫性疾病中，Th1/Th2平衡失调的表现各不相同。类风湿性关节炎、1型糖尿病、多发性硬化及慢性甲状腺炎等疾病中，Th1或Th1分泌的细胞因子占优势，Th1诱导发病，加重病情；Th2则能减轻病症，甚至阻止发病，这与Th1/Th2的炎性及抗炎性反应有关。基于Th1/Th2漂移状态与各种疾病的关系，越来越多的研究正倾向于发现、开发能逆转或稳定Th1/Th2状态的药物和方法。

表位是蛋白质抗原性的基础，蛋白质抗原通过表位体现其免疫特性，就某一蛋白质而言，它含有多种表位如B细胞表位又称抗原决定簇(antigenic determinant，AD)，T辅助细胞(Th)表位等等，还有抑制性表位，毒性表位，交叉反应性表位等等。选择合适的表位并且通过合适的方法与其他肽或者蛋白质等等连接以及用什么佐剂及剂型，如何免疫等等才能得到理想的多肽和蛋白疫苗，产生特异的高效价(高滴度)抗体是有巨大的挑战性的。小鼠体内Th1会产生IgG2a亚型抗体，Th2型则会产生IgG1和IgG2b亚型抗体，Th2亚型抗体可以增加Th2型细胞因子的产生并能治疗Th1偏高疾病，缓解病症。

当前判断疾病免疫发病机制中Th1或Th2细胞效应为主导的方法，主要是依据炎症组织局部细胞因子的表达，也可根据外周血清中抗体反应亚类的变化进行判断。在动物模型的研究中，根据干扰Th1或Th2细胞效应的各种环节后Th1或Th2细胞效应的变化来判断的与Th1偏高相关的人类感染疾病及自免疫性疾病有1型糖尿病及并发症，肾脏病，肾炎，类风湿性关节炎，反应性关节炎，多发性硬化，自身免疫性甲状腺炎，接触性皮炎，结节性红斑，习惯性流产等等。