[发明专利]检测马铃薯主食粉或马铃薯主食中马铃薯粉含量的方法

权利要求书

1.检测马铃薯主食粉中马铃薯粉含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)配制混合粉：按照小麦粉与马铃薯粉的重量比例分别为10:0，9:1，8:2，7:3，6:4，5:5，4:6，0:10配制混合粉，备用；

(2)制备标准溶液：将步骤(1)的7个混合粉分别与pH7.4的磷酸盐-0.8％NaCl-0.05％KCl-1.5％SDS缓冲溶液以固液比1:8混合摇匀后，超声波辅助提取80min，将所得提取液置于高速离心机中，10000-12000g离心10-15min，弃去沉淀，收集上清液，旋转蒸发浓缩或冻干后，用pH7.4的磷酸盐-0.8％NaCl-0.05％KCl-1.5％SDS缓冲溶液复溶，即得；

(3)制备上样溶液：向步骤(2)得到的溶液中加入还原型上样缓冲溶液，沸水浴加热处理5min，离心，取上清液，即得；

(4)电泳：采用12.5％的聚丙烯酰胺凝胶电泳进行检测，浓缩胶浓度5％，先用80V电压电泳10min，转用120V电压电泳1h；

(5)染色及脱色：凝胶置于保鲜盒中，加入50mL考马斯亮蓝R250染色液，震荡染色3h后，弃去染色液；加入50mL脱色液，震荡脱色2h，脱色期间需更换脱色液3-4次；

(6)定量分析：采用Image J软件对所得电泳图中的马铃薯糖蛋白进行定量分析，以小麦粉和马铃薯粉的重量比例为横坐标，马铃薯糖蛋白量为纵坐标，绘制标准工作曲线，得回归方程为y＝0.19x+0.59，R²＝0.97；

(7)待测样品检测：采用与步骤(2)-(6)相同的方法，仅将混合粉替换为待测样品，并将得到的马铃薯糖蛋白量数值带入回归方程，得待测样品中马铃薯粉的含量。