[发明专利]棉花黄萎病菌内源几丁质酶及其编码基因和应用

说明书

本发明涉及基因工程领域，具体涉及棉花黄萎病菌内源几丁质酶及其编码基因和应用，其氨基酸序列如SEQ ID No:1所示，本发明的几丁质酶耐热性高，容易保存，应用范围广，受环境影响小；可以诱导植物产生超敏反应，并伴随有活性氧的迸发，启动了植物初级免疫反应；用几丁质酶VDECH处理植物叶片，可以诱导植物防御相关基因的上调表达，提高了植物的抗性，为防控植物病害和转基因抗病育种均具有重要意义。

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体涉及棉花黄萎病菌内源几丁质酶及其编码基因和应用。

背景技术

几丁质在自然界中广泛存在，棉花是世界性重要的经济作物和纺织工业原料，棉花枯萎病、黄萎病的普遍发生始终是制约棉花高产的瓶颈问题，该病害为全生育期发生的维管束真菌病害，防控难度大。

几丁质酶是几丁质生物降解过程中的关键酶，广泛存在于各种生物中，并参与其中的多种生理生化过程。几丁质酶水解几丁质后产生的生物活性物质几丁寡糖被广泛应用在农、医、化工、食品、环境保护等多个领域。真菌几丁质酶作为其中的重要成员，主要应用于生物防治植物病害或转基因抗性育种。

本发明通过同源克隆的方法，从棉花黄萎病菌中克隆得到几丁质酶基因VDECH，并在大肠杆菌中高效表达了该蛋白，VDECH可以成功诱导植物产生超敏反应，并伴随有活性氧的积累，上调了植物防御相关基因的表达量。HIS-VDECH重组蛋白的获得方法简单，耐热谱宽，生产成本和保存成本很低，可以直接应用于病害防控。棉花黄萎病菌内源几丁质酶基因VDECH，在棉花转基因抗病育种实施过程中具有良好的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供棉花黄萎病菌内源几丁质酶。

本发明的再一目的是提供棉花黄萎病菌内源几丁质酶基因。

本发明的再一目的是提供上述棉花黄萎病菌内源几丁质酶的应用。

根据本发明的棉花黄萎病菌内源几丁质酶，其氨基酸序列如SEQ ID No:1所示。

SEQ ID NO:1

MKFSILLSALAVTPALAVPTVGSRSTSSSTSGYSYSYGSRNNSHSDSSHYSSSSSSSSSSSNDHNSDDCDDVSNNSNNNDQNSNSASNNGWSNGLNNGKSKHPTGIYVVNPAGKSGTGYGSNSGSGSGSGSGSTPGSGSGSGSGSTPGSGSGSGSGSTPGSGSGSGSSSGSDNTPGSGSGSTPGSGSSSGSGSTPGSGSSSGSGSGSSSGSGKGFSDPASQGHRNVLYVTNWGIYGANYQPDQIPADKVTHINYAFANIQDDGTVFSSDPWADTEKGFPGDNTTEPGNNAYGLVKQIYQKKIENRSLKVLLSIGGWTWSPKFPPVVADDKKRARFVASAVKLITDWGMDGIDVDWEYPNTPALNKQCVILLQELRQALDEYSAKHANGYHFLLTFAAPAGSQNYGAFDLAAMDKSLDYWSLMAYDFAGSWDNTTAHASNIFPNPFNPVSTKSNINQAIDDYIKGGVAPAKFNLGIPLYGRGFNNTNGMGKPYHGVPVDSLGNQGTLMYKYLPLPGAKVEFDPIAQGTYSYDSKTRQLYSFDDIKSAGAKADYLQFRGLGGAMYWEGSGDKTGDESIVSYVAKKIGLEKSQNLLWYPVSVYDNIRGNLGQAVAKQS

其信号肽序列为：

SEQ ID NO:2

MKFSILLSALAVTPALA

去除信号肽后成熟蛋白的序列为：

SEQ ID NO:3