[发明专利]胎盘脂多糖、多肽二联免疫增强剂及其制备方法

权利要求书

1.一种动物胎盘脂多糖、多肽的联产提取工艺，其特征在于：具体步骤如下：

A、原料处理：经检疫合格的新鲜动物胎盘去胎膜、脐带、血块后用纯水冲洗干净，依次用绞肉机、胶体磨、研磨机粉碎后，放-20℃以下冷库速冻24-48 h，然后取出37℃水浴融化，如此冻融3-5次后置于反应釜中进行消化酶解，所述动物胎盘为猪、牛、羊胎盘；

B、消化酶解：向反应釜中加2-3倍原料重的生理盐水，加入原料重量30-50%的新鲜胰浆，调pH值至7.5-9.0，间隙搅拌下，加热至50-55℃，消化10-15 h后，加热至60℃，用超声波发生器中波处理20-30 min，冷却至室温，离心或过滤，离心上清液或滤液为酶解液，滤渣为蛋白原料1；

C、冷藏离心：将酶解液调pH值至4.0-6.0，放冷藏室静置过夜，然后4-8℃条件下高速离心20-30 min，分别收集上清液和沉淀，上清液即为脂多糖、多肽粗提液，沉淀作为蛋白原料2；

D、超滤提取：将脂多糖、多肽粗提液用截留分子量10万的超滤装置进行超滤，收集浓缩液1为蛋白原料3；透过液再经截留分子量1万超滤装置进行超滤，收集浓缩液2即为脂多糖提取液，透过液为多肽提纯液；

E、脂多糖热处理：将脂多糖提取液用生理盐水稀释至脂多糖含量每毫升10-30 mg，放100-120℃水浴加热40-60 min，降至室温，在转速3000-5000 r/min条件下离心20-30 min，分别收取上清液和沉淀，上清液进入层析纯化，沉淀为蛋白原料4；

F、层析纯化：将上清液过分子筛柱Sephadex G-100或 G-200，用生理盐水作平衡液和洗脱液，收集脂多糖含量高的洗脱液即为脂多糖提纯液，含量低的洗脱液收集作为下次洗脱液用；

G、膜过滤精制：将脂多糖提纯液和多肽提纯液分别依次经1.0 μm、0.60 μm、0.45 μm生物膜过滤分别得脂多糖精制液和多肽精制液；

H、将上述蛋白原料1、2、3、4混合，搅拌均匀，经真空干燥制成蛋白粉原料为本工艺副产物。

2.根据权利要求1所述的联产提取工艺，其特征在于：B步骤中所述的新鲜胰浆通过以下方法制得：取新鲜胰脏，去脂肪，绞碎1-2次，称重，加等量纯水，高速匀浆或搅拌均匀即可。

3.根据权利要求1所述的联产提取工艺，其特征在于：C步骤中，高速离心的转速为8000r/min以上。