[发明专利]多表位测定

权利要求书

1.一种前列腺特异性抗原(PSA)检测组件在制备在亲和力测定中检测PSA的试剂盒中的用途，所述检测组件包括PSA-10抗体捕获部分、PSA-36抗体捕获部分和PSA-66抗体捕获部分，其中试剂与PSA-36抗体捕获部分结合，并且其中所述PSA-66抗体捕获部分允许与检测表面直接或间接结合，从而使得能够检测，其中所述PSA-10抗体捕获部分粘附至磁性颗粒，其中所述PSA-10抗体捕获部分通过接头与所述磁性颗粒连接，所述接头包含DNA接头，所述DNA接头由48个碱基对的双链DNA随后10个碱基的单链DNA组成，其中DNA是DNAse可消化的且是用EcoRI可切割以特异性洗脱的，通过包括以下步骤的方法检测所述PSA：

a)提供包含浓度为4-10ng/ml的所述PSA的生物学样品体积；

b)将PSA-10抗体捕获部分加入所述生物学样品体积，其中所述PSA-10抗体捕获部分捕获所述PSA；

c)通过磁性颗粒分离在十五分钟的时间内将捕获的PSA浓缩为小于5μL的洗脱体积，所述洗脱体积比步骤a)中的生物学样品体积小至少80倍；

d)用DNAse或EcoRI从所述磁性颗粒切割所述PSA-10抗体捕获部分；

e)以夹心亲和力测定形式直接或间接检测和/或定量所述PSA，其中所述PSA与PSA-36抗体捕获部分和PSA-66抗体捕获部分结合，所述PSA-36抗体捕获部分与试剂结合，所述PSA-66抗体捕获部分允许在检测表面上再捕获所述PSA。

2.权利要求1所述的用途，其中在步骤e)中，所述PSA与进一步的捕获部分结合。

3.权利要求1所述的用途，其中与PSA-36抗体捕获部分结合的试剂选自：

放射性同位素；

固相；

荧光、磷光和/或化学发光染料；或

聚合物或大分子。

4.权利要求1所述的用途，其中与PSA-36抗体捕获部分结合的试剂选自：

酶和/或酶底物；

核酸序列、肽；或

胶体或纳米颗粒。

5.权利要求3所述的用途，其中所述固相是磁珠或乳胶珠。

6.权利要求3所述的用途，其中所述聚合物或大分子是树状聚体或脂质体。

7.权利要求1-6中任一项所述的用途，其中所述检测和/或定量方法选自：

-光学检测；

-酶反应；

-核酸扩增技术；

-磁性检测；

-声波检测；或

-电检测。

8.权利要求7所述的用途，其中所述光学检测选自荧光、磷光、化学发光、吸收、散射、成像、瞬逝场技术、FTIR、表面等离子共振、拉曼或光谱学。

9.权利要求7所述的用途，其中所述核酸扩增技术是免疫-PCR或滚环扩增。

10.权利要求7所述的用途，其中所述磁性检测通过磁致电阻、霍尔效应或线圈进行。

11.权利要求7所述的用途，其中所述声波检测选自表面声波、体声波、悬臂或石英晶体。

12.权利要求7所述的用途，其中所述电检测选自电导、阻抗、电流、氧化还原循环或电荷。

13.权利要求1-5中任一项所述的用途，其中所述试剂为磁珠，并且所述PSA与进一步的捕获部分结合。