[发明专利]一种高灵敏度微米结构生物芯片的构建方法

权利要求书

1.一种高灵敏度微米结构生物芯片的构建方法，其特征在于，包括：

S101：将玻璃片置于刻蚀液中，超声震荡后，取出所述玻璃片，清水洗涤120℃烘干2h，得到清洗后的玻璃片；

S102：将所述清洗后的玻璃片进行环氧基化反应，得到环氧基化玻璃片；

S103：将所述环氧基化玻璃片依次叠加，在所述环氧基化玻璃片的叠加区域加入PEG进行氨基化反应，得到氨基化玻璃片；

S104：利用乙醇胺封闭液对所述氨基化玻璃片未标记上的氨基化玻璃表面进行封闭反应，利用无水乙醇洗脱，得到封闭后的玻璃片；

S105：将所述封闭后的玻璃片进行生物素标记反应，利用无水乙醇洗脱，空气吹干，得到生物素标记后的玻璃片；

S106：将所述生物素标记后的玻璃片进行标记光敏化合物S1818反应，得到预处理的玻璃片；

S107：采用生物微机电在所述预处理的玻璃片的表面构建3μm结构，得到生物芯片。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述采用生物微机电在所述预处理的玻璃片的表面构建3μm结构，得到生物芯片的步骤包括：

采用生物微机电在所述预处理的玻璃片的表面构建3μm结构；

利用GDPTS复合封闭剂对所述生物芯片的空白区域进行封闭反应。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述将所述清洗后的玻璃片进行环氧基化反应的步骤包括：

将所述清洗后的玻璃片置于γ-缩水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷溶液中，利用磁力搅拌器在25℃恒温恒速300rpm搅拌，反应12h。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述在环氧基化玻璃片的叠加区域加入PEG进行氨基化反应的步骤包括，

在所述环氧基化玻璃片的叠加区域加入100μl的PEG，在25℃恒温标记反应12h，洗脱，空气吹干。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述将所述封闭后的玻璃片进行生物素标记反应的步骤包括：

将所述封闭后的玻璃片置于生物素溶液中，25℃恒温恒速300rpm搅拌。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述将生物素标记后的玻璃片进行标记光敏化合物S1818反应的步骤包括：

将所述生物素标记后的玻璃片，真空吸附玻璃片离心机上，高速甩干标记光敏化合物S1818，之后95℃烘干4min。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述γ-缩水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷溶液为将5mlγ-缩水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷溶解于95ml的乙醇中。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述PEG为PEG6000。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生物素为N-琥珀酰亚胺基酯溶液,将10mgN-琥珀酰亚胺基酯溶解在100ml二甲基亚砜溶液中。

10.根据权利要求1-9任一项所述的方法，其特征在于，所述采用生物微机电在所述预处理的玻璃片的表面构建3μm结构的步骤包括：

生物微机电采用接触性光刻技术在所述预处理的玻璃片的表面构建3μm结构。