[发明专利]一种具有杀菌活性的仿刺参肽聚糖识别蛋白及其制备方法和应用有效
申请号: | 201611143071.2 | 申请日: | 2016-12-07 |
公开(公告)号: | CN106749588B | 公开(公告)日: | 2019-03-29 |
发明(设计)人: | 孔令明;丛海燕 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C12N15/70;A61K38/17;A61P31/04;A23K20/147 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 赵妍 |
地址: | 264209 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肽聚糖识别蛋白 仿刺参 金黄色葡萄球菌 制备方法和应用 大肠杆菌 杀菌活性 分子生物学领域 基因工程技术 枯草芽孢杆菌 新型广谱抗菌 氨基酸序列 饲料添加剂 凝集 灿烂弧菌 体外重组 药物开发 重组蛋白 应用 开发 | ||
1.一种具有杀菌活性的仿刺参肽聚糖识别蛋白,其特征在于,所述仿刺参肽聚糖识别蛋白AJ-PGRP为序列表SEQ ID NO.1中氨基酸序列所示。
2.如权利要求1所述的一种肽聚糖识别蛋白AJ-PGRP的制备方法,其特征在于,制备方法如下:
(1)以仿刺参cDNA为模板,用引物F1和R1进行PCR扩增,待用;
(2)PCR产物经纯化后与载体pEASY-E1载体进行连接,连接产物转化大肠杆菌,测序鉴定重组子;
(3)将表达载体pEASY-AJ-PGRP转入Trans BL21(DE3)化学感受态细胞,筛选转化子,将转化子接种于含有氨苄青霉素的LB培养基中,用IPTG诱导表达,而后用亲和层析柱纯化重组蛋白,即得到序列表SEQ ID No.1中氨基酸序列的肽聚糖识别蛋白AJ-PGRP;
所述引物分别为:F1:5’-ATGGATGAACCGCCGCGTGCCTT-3’,R1:5’-ATGGTGATGTATAATTTCTTG-3’。
3.如权利要求1所述的一种具有杀菌活性的仿刺参肽聚糖识别蛋白的应用,其特征在于,所述序列表SEQ ID NO.1中氨基酸序列的AJ-PGRP用于制备广谱抗菌类制剂或饲料添加剂。
4.如权利要求1所述的一种具有杀菌活性的仿刺参肽聚糖识别蛋白的应用,其特征在于,所述序列表SEQ ID NO.1中氨基酸序列的AJ-PGRP用于制备抗金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、灿烂弧菌和枯草芽孢杆菌的制剂。
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