[发明专利]毕赤酵母诱导表达磷脂酶C的方法在审
| 申请号： | 201611130102.0 | 申请日： | 2016-12-09 |
| 公开（公告）号： | CN108611336A | 公开（公告）日： | 2018-10-02 |
| 发明（设计）人： | 杨倚铭;吴清杭;关惠琴;常桂芳 | 申请（专利权）人： | 丰益（上海）生物技术研发中心有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/16 | 分类号： | C12N9/16;C12N15/81;C12R1/84 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人： | 王洁 |
| 地址： | 200137 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 外源性蛋白 诱导表达 低温控制工艺 毕赤酵母 酵母表达 节能降耗 目标蛋白 磷脂酶C 产业化 发酵 放大 | ||
1.一种提高酵母表达外源性蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括于32～35℃诱导表达所述外源性蛋白。
2.一种通过控制发酵液的RQ值以提高酵母表达外源性蛋白的方法。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述表达外源性蛋白为通过甲醇诱导表达所述外源性蛋白。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，在诱导表达外源性蛋白阶段，控制发酵液的RQ值。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述控制发酵液的RQ值为当所述发酵液的RQ为0.58-0.60时，进行干预，以降低所述发酵液的RQ值。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述干预为降低发酵温度，优选为降低发酵温度至28-30℃。
7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述降低所述发酵液的RQ值为降低所述发酵液的RQ值至0.55-0.56。
8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其特征在于，所述外源性蛋白为磷脂酶C，优选如SEQ ID NO:1所示，和/或，所述酵母为毕赤酵母，优选为GS115，SMD1168，x33，KM71，KM71H，SMD1163及其基因工程菌中的一种或多种，所述毕赤酵母更优选为表达SEQ ID NO:1所示磷脂酶C的菌株，更优选为PLC-N63DN131SN134D-Y56H。
9.如权利要求1-8中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括批发酵步骤、甘油补料步骤和饥饿培养步骤中的一个或多个步骤。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述批发酵步骤包括将所述毕赤酵母菌株于28-30℃，DO％>20％条件下发酵16-26h；所述甘油补料步骤包括流加甘油使DO为15-30％，培养至菌体湿重200～220g/L；所述饥饿培养包括使发酵液处于缺少碳源的状态下培养，优选不进行补料操作，和/或，优选在结束甘油补料步骤后进行饥饿培养。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于丰益（上海）生物技术研发中心有限公司，未经丰益（上海）生物技术研发中心有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201611130102.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
