[发明专利]一种去甲基金霉素的提取方法

说明书

本发明提供一种去甲基金霉素的提取方法，其包括如下步骤：调发酵液的pH值至酸性，发酵液与菌体固液分离，得液体1；所得液体1与3‑4％的阳离子表面活性剂，在pH值为8.0‑8.5，发生络合反应，固液分离，得络合物1；阳离子表面活性剂为十四烷基三甲基氯化铵和/或十六烷基三甲基氯化铵；所述百分比为阳离子表面活性剂的质量占液体1的质量的百分比；调所得络合物1的pH值，与尿素发生络合反应，固液分离，得络合物2；调所得络合物2的pH值，使之溶解，固液分离，得液体2；用盐酸调节所得液体2的pH值，降温、结晶，得DMCTC盐酸盐。该甲基金霉素的提取方法，可获得纯度≥94％的DMCTC盐酸盐。

技术领域

本发明涉及一种去甲基金霉素的提取方法。

背景技术

去甲基金霉素(英文名称Demethylchlortetracycline，缩写DMCTC，其结构如式1所示)具有较宽的抗菌谱，对革兰阳性菌包括耐四环素的金黄色葡萄球菌、链球菌等和革兰阴性菌中的淋病耐瑟菌均有很强的作用，是生产米洛环素和替加环素关键前体，是一种重要的医药原料。

去甲基金霉素由金黄色链霉菌(Streptomyces aureus)发酵生产，然后通过分离提取得到原料药去甲基金霉素盐，目前主要报道的分离提取的工艺主要有：(1)发酵液经过酸化、萃取、反萃取、浓缩结晶方法(中国抗生素杂志，2000，25：341-343)，其缺点是使用了大量的有机溶媒，污染大；(2)利用柱层析纯化法提取去甲基金霉素(中国抗生素杂志，2013，38：915-917)，其缺点是生产成本高，不适用于工业化大生产；(3)发酵液调至碱性pH，加入晶种结晶的方法(CN201310575459)。虽然操作简单，但由于去甲基金霉素在碱性条件下稳定性差，容易形成DMCTC差向异构体；(4)将浓缩脱色的发酵液调节pH在4.5-8.5，结晶沉淀，然后利用去甲基金霉素复盐法精制(CN201310380480)。但分离过程需要利用树脂对发酵液脱色减少杂质，增加了操作成本。

DMCTC的价格便宜、用量大，应用中对其纯度有较高的要求，现有的工艺制得的DMCTC的纯度无法达到94％以上，因此，会限制其大规模生产应用，因此开发一种污染小、成本低、简单可行的生产工艺以使DMCTC的纯度达到94％以上，甚至达到USP质量要求(纯度≥95％)是目前亟须解决的问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是为了克服现有技术中有机溶媒使用量大、生产成本高等缺陷，而提供一种污染小、成本低的去甲基金霉素的提取方法。

本发明提供了一种去甲基金霉素的提取方法，其包括如下步骤：

(1)调含去甲基金霉素的发酵液的pH值至酸性，所述发酵液与菌体进行固液分离，得液体1；

(2)所得液体1与3-4％的阳离子表面活性剂，在pH值为8.0-8.5，发生络合反应，固液分离，得络合物1；所述阳离子表面活性剂为十四烷基三甲基氯化铵和/或十六烷基三甲基氯化铵；所述百分比为所述阳离子表面活性剂的质量占所述液体1的质量的百分比；

(3)调所得络合物1的pH值，并与尿素发生络合反应，固液分离，得络合物2；

(4)调所得络合物2的pH值，所得络合物2溶解，固液分离，得液体2；

(5)用盐酸调节所得液体2的pH值至酸性，降温、结晶，得DMCTC盐酸盐。

本发明中，所说的含去甲基金霉素的发酵液为本领域常规所说的由金黄色链霉菌(Streptomyces aureus)发酵生产得到的发酵液，其中含有去甲基金霉素。

步骤(1)中，所述调发酵液的pH值的操作为本领域常规，所述pH值较佳地调至1.0-2.0，所述pH值更佳地调至1.5。所述调pH值的物质为本领域常规pH调节剂，如硫酸水溶液。