[发明专利]一种全自动生化分析仪用尿液脑脊液总蛋白检测试剂

说明书

技术领域

本发明涉及尿液、脑脊液总蛋白检测技术领域，具体涉及一种全自动生化分析仪用尿液脑脊液总蛋白检测试剂。

背景技术

蛋白质是生命新陈代谢不可或缺的重要物质。

脑脊液蛋白质由血液经血脑屏障滤过进入脑室、蛛网膜下腔和脊髓中央管内形成，或中枢神经合成。正常脑脊液总蛋白不大于0.42g/L。当血脑屏障破坏或多发性硬化症等疾病时，中枢神经自身免疫球蛋白合成增加时，脑脊液总蛋白增加。

正常肾小球电荷屏障及膜屏障作用下，少量白蛋白进入初尿，经过肾小管的重吸收作用，绝大部分蛋白质被重吸收，只有极少量蛋白进入终尿液，排除体外，正常人24尿总蛋白不大于150mg。当肾小球发生病变导致滤过蛋白增加或肾小管病变导致重吸收减少，尿中蛋白质增加，形成蛋白尿。

脑脊液、尿液中的蛋白质含量较低，需要更灵敏的方法测定。临床常用的检测脑脊液、尿液总蛋白的方法有

1：比浊法磺基水杨酸-硫酸钠法、三氯乙酸法等。

2：染料法考马氏亮蓝法、丽春红S法等。

上述检测方法的缺点如下：

1、比浊法磺基水杨酸-硫酸钠法、三氯乙酸法等。该方法抗干扰能力弱，检测结果准确度差。

2、染料法考马氏亮蓝法、丽春红S法等，染料与蛋白结合时产生颜色变化，颜色深浅与蛋白质浓度呈正相关，通过与标准曲线比较可以计算出蛋白的浓度。该类方法呈色稳定且灵敏度高。但色素易吸附于器皿，不适于全自动生化分析仪检测。

发明内容

针对以上问题，本发明提供一种全自动生化分析仪用尿液脑脊液总蛋白检测试剂，采用丁二酸-苯甲酸钠缓冲液，并在试剂中加入甲醇，增加了邻苯三酚红溶解度、稳定性及灵敏度，采用双试剂配方，有效解决了尿胆原及乳糜等因素影响，可以有效解决背景技术中的问题。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：一种全自动生化分析仪用尿液脑脊液总蛋白检测试剂，该试剂由缓冲液R1和显色液R2两种试剂组成，其成分如下：

R1：甲醇10-12％

苯甲酸钠2.5-2.7mmol/L

丁二酸50-54mmol/L

R2：邻苯三酚红240-250umol/L

钼酸钠140-145umol/L。

优选的，该试剂由缓冲液R1和显色液R2两种试剂组成，其成分如下：

R1：甲醇11％

苯甲酸钠2.6mmol/L

丁二酸52mmol/L

R2：邻苯三酚红245umol/L

钼酸钠142umol/L。

优选的，该试剂通过显色液R2中的邻苯三酚红与钼酸形成的红色复合物，在酸性条件下与蛋白质结合形成蓝紫色复合物，吸光度与样本中的蛋白质含量正相关，通过与标准曲线，计算出蛋白质的浓度。

优选的，所述红色复合物的最大吸收波长470nm。

优选的，所述蓝紫色复合物的最大吸收波长604nm。

优选的，其酸性条件的ph值为2.5。

本发明的有益效果：

本发明采用丁二酸-苯甲酸钠缓冲液，并在试剂中加入甲醇，增加了邻苯三酚红溶解度、稳定性及灵敏度，采用双试剂配方，有效解决了尿胆原及乳糜等因素影响。

附图说明

图1为实施例3中蛋白浓度线性图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1：

本发明提供了一种全自动生化分析仪用尿液脑脊液总蛋白检测试剂，该试剂由缓冲液R1和显色液R2两种试剂组成，其成分如下：

R1：甲醇10％

苯甲酸钠2.5mmol/L

丁二酸50mmol/L

R2：邻苯三酚红240umol/L

钼酸钠140umol/L。

该试剂通过显色液R2中的邻苯三酚红与钼酸形成的红色复合物，在酸性条件下与蛋白质结合形成蓝紫色复合物，吸光度与样本中的蛋白质含量正相关，通过与标准曲线，计算出蛋白质的浓度；所述红色复合物的最大吸收波长470nm；所述蓝紫色复合物的最大吸收波长604nm；其酸性条件的 ph值为2.5。

实施例2：