[发明专利]一种土生戈登氏菌的全细胞植物油提取物的制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医学工程领域，具体涉及一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物的制备方法，同时还涉及一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物的用途。

背景技术

目前在国内的促进伤口愈合的药物有限，且主要以抗炎、止血、保护创面为主,但这些作用只对创伤早期有效，而对真正体现伤口愈合速度的各种组织细胞的增殖作用较少，且大多都有副作用。开发一种多功能的安全、环保、副作用小且疗效显著的含有天然活性成分的新型药物具有深远的意义。

疱疹性口炎是由人类单纯疱疹病毒导致的急性炎症性皮肤黏膜病，由1型单纯疱疹病毒引起，感染该病毒的患者出现口腔黏膜、口腔周围、颜面部皮肤和咽喉部疱疹，还可能感染鼻翼、生殖器等部位，部分患者出现眼部疱疹性角膜炎。该病临床症状带来生活上不便，产生痛苦，且无特效方法治疗，容易复发，严重者可留色素和轻度疤痕，影响美观。

发明者从事分枝杆菌研究近30年，经研究发现：分枝杆菌，戈登氏菌的细胞壁有着特殊的结构，那就是分枝杆菌多糖(MSP)。它具有明显的免疫调节功能，尤其调节细胞的免疫应答。本发明即土生戈登氏菌的全细胞植物油提取物中其氨基酸含量丰富、类胡萝卜素特别是β-胡萝卜素含量高，还含有甲基萘醌、黄酮、多糖和丰富的维生素等天然生物活性物质，赋予了该提取物促进伤口愈合和抗氧化和免疫调节等多种功能。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物的制备方法，方法简单，易行，易于大规模生产，该细胞提取物具备促进伤口愈合、对疱疹性口炎具有显著疗效的作用。所述的土生戈登氏菌sq-5(Gordona terrae sq-5)保存于武汉大学中国典型培养物保藏中心，编号为CCTCC NO:M2012390。该菌为专利菌种，专利号为:ZL2013 10016059.5。

本发明的最后一个目的在于提供了一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物在制备治疗或预防(促进)伤口愈合、烧伤、烫伤和/或治疗疱疹性口炎等药物中的应用，所述的应用包括但不限于用于制备促进伤口愈合和/或治疗疱疹性口炎等的药物。该提取物其氨基酸含量丰富、类胡萝卜素特别是β-胡萝卜素含量高，还含有甲基萘醌、黄酮、多糖和丰富的维生素等天然生物活性物质，能有效促进伤口愈合,对疱疹性口炎具有明显的治疗效果。本发明绿色环保,基本没有副作用。

为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施：

一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物，包括以土生戈登氏菌sq-5为原料，利用本领域的常规方式，用植物油对土生戈登氏菌sq-5进行浸提获得的上清。

一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物的制备方法，其步骤是：

A、菌种培养：斜面种子培养基察氏培养基，将冻干种子sq-5(专利号为:ZL2013 10016059.5)接种于茄子瓶斜面，28－32℃培养3天。检查无杂菌，生长健壮，均匀，用无菌水转入接种瓶。

B、种子罐培养：将上述A中接种瓶种子转入种子罐，培养温度28－32℃，通气量1:0.6－0.8，自动流加泡敌，培养30－35h，取样镜检，合格后备用。

C、发酵罐培养：以5－10％的接种量将上述B中培养好的种子罐种子液打入发酵罐，通气量1:0.8，自动流加泡敌，28－32℃培养48－52h，菌体单个球杆状，菌数10⁸－10¹⁰个/ml，停止发酵。

D、将上述C中培养好的发酵液100℃煮沸灭活后浓缩，浓缩物108－112℃烘干收集菌体，粉碎过筛(120目)，得到土生戈登氏菌全细胞菌粉。

E、植物油浸提：将上述D中收集的土生戈登氏菌全细胞菌粉1－3份，植物油(大豆油或芝麻油)98－102份于80℃浸提4－5h，浸提完后于6500r/min离心10min收集上清液获得土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物。

所述的种子罐和发酵罐发酵用培养基配方：

一种土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物在制备治疗或预防(促进)伤口愈合、烧伤、烫伤和/或治疗疱疹性口炎等药物中的应用，其步骤是：

A、将上述土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物无菌罐装制成油剂用于治疗疱疹性口炎的药物。

B、将上述土生戈登氏菌sq-5的全细胞植物油提取物无菌罐装制成油剂用于治疗创伤(包括手术伤口、烧伤和烫伤等)的药物。