[发明专利]PF-127-miRNA-615 agomir复合物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种PF‑127‑miRNA‑615 agomir复合物及其制备方法和应用，其中PF‑127‑miRNA‑615 agomir复合物是由Pluronic F‑127水凝胶包裹miRNA‑615 agomir而成。本发明提供了可负载miRNA‑615 agomir并能填充损伤裂隙的运载体，实现miRNA‑615 agomir的精确递送和局部缓释并能够为神经轴突的生长提供三维空间和力学支撑性能。因此，该PF‑127‑miRNA‑615 agomir复合物能够有力促进臂丛神经根性撕脱的神经再生修复，为中枢和外周神经损伤提供治疗新途径。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种PF-127-miRNA-615agomir复合物及其制备方法和应用。

背景技术

臂丛神经撕脱(Brachial Plexus Avulsion,BPA)是一种常见的致残性外科创伤，尤其是全臂丛神经根性撕脱，致残率高、疗效不佳、预后差。随着家庭机动车辆和现代交通物流的不断发展，臂丛损伤的发病率逐年增加，其最常见的病因为交通意外和新生儿难产所造成的牵拉性损伤。神经根由中枢部分和外周部分组成，二者的交界部分称为“过渡区”(transitional zone,TZ)。臂丛撕脱是神经根与脊髓在TZ区发生的物理性断离，不仅引起外周神经断裂，还导致相应脊髓节段神经元严重损伤和大量死亡，神经轴突断裂、突触结构破坏、神经网络中断等，造成受损神经对应皮节的感觉丧失及所支配上肢肌肉瘫痪。为了恢复神经通路和运动功能，受损神经元必须存活和再生轴突，并外向延伸穿过TZ瘢痕，重新进入外周神经干并与所支配肌肉重建突触联系。虽然通过神经外科再植术能使部分运动神经元存活并获得一定的轴突再生，但由于局部病理微环境的抑制作用，胶质瘢痕形成，以及轴突再生能力极其有限等原因，神经再生和运动功能恢复的效果并不令人满意。因此，臂丛神经根性撕脱治疗的关键问题在于如何改善损伤局部的抑制性病理微环境，有效促进神经轴突的再生修复与外向延伸，以恢复过渡区神经联系的延续性，重建突触联系，改善肢体的运动功能。

相关研究发现，髓磷脂相关抑制因子是脊髓损伤后局部微环境中的重要抑制因素。该类抑制因子由髓鞘和胶质瘢痕合成释放，主要包括轴突生长抑制因子(neuriteoutgrowth inhibitory A，NogoA)、髓磷脂相关糖蛋白(myelin-associatedglycoprotein,MAG)和少突胶质细胞髓磷脂糖蛋白(oligodendrocyte myelinglycoprotein,OMgp)。这些髓磷脂相关抑制因子可与神经细胞上的共受体成分LINGO-1(LRR and Ig domain-containing Nogo receptor interacting protein)结合而介导抑制效应，抑制中枢神经轴突生长和髓鞘形成。LINGO-1在脑和脊髓的神经元及少突胶质细胞上选择性表达，参与细胞膜上NgR1/p75/LLNGO-1或NgR1/Troy/LINGO-1信号转导复合物的构成。LINGO-1与抑制因子结合使信号复合物活化，通过RhoA激酶的作用将下游抑制信号转导入神经元和少突胶质细胞，从而阻碍神经轴突的再生修复与髓鞘的形成。研究表明，拮抗LINGO-1对脊髓损伤后的神经再生和功能恢复有明显促进作用。同时，我们的前期研究发现，用慢病毒Lingo-1 RNAi干扰LINGO-1的表达，可影响移植性神经干细胞的发育分化，并能促进脊髓全横断大鼠的神经再生和运动功能恢复。但关于其发挥作用的胞内机制，目前尚未可知。