[发明专利]抑制军团菌微生物源抗菌肽及其制备方法在审
申请号: | 201610388200.8 | 申请日: | 2016-06-02 |
公开(公告)号: | CN107459561A | 公开(公告)日: | 2017-12-12 |
发明(设计)人: | 王宏鹏;李音;于林凯;吴元锋;黄俊;杨瑞芹;刘士旺;毛建卫 | 申请(专利权)人: | 浙江科技学院 |
主分类号: | C07K11/02 | 分类号: | C07K11/02;C12P21/04;A61K38/15;A61P31/04;A61P11/00 |
代理公司: | 杭州宇信知识产权代理事务所(普通合伙)33231 | 代理人: | 张宇娟 |
地址: | 310023 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 抑制 军团 微生物 抗菌 及其 制备 方法 | ||
1.环缩酚肽,其结构式如下所示:
Acyl是C10~C16直链或带有支链的脂肪酸;
或式中经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且有同等活性的衍生多肽。
2.如权利要求1所述的环缩酚肽,其特征在于,包括全L-型和全D-型对映异构体或者所述的抗菌肽任意一个或几个氨基酸用L-型和D-型氨基酸取代。
3.权利要求1或2所述环缩酚肽的制备方法,包括如下步骤:
1)发酵:将芽孢杆菌HZ16接种到LB培养基中发酵24h,获得发酵液。
2)干燥:将步骤1中收集的发酵液利用冷冻干燥法除掉水分。
3)粗提:利用有机溶剂对步骤2中获得的固体进行萃取,获得粗提物。
4)纯化:利用制备色谱将步骤3中的粗提物进行分离获得活性多肽组分。
5)冻干:将步骤4中获得的生物活性肽利用旋转蒸发以及冷冻干燥。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤1)所述的发酵条件为:发酵温度28~32摄氏度,摇床转速180~200r/min。
5.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤2)所述的干燥条件温度梯度-20~20摄氏度。
6.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤3)所述的提取条件为乙酸乙酯溶剂进 行超声波震荡。
7.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤4)的所述的纯化条件:首先将初膏用甲醇溶解,用二醇基色谱制备获得粗组分,然后用岛津制备液相利用Vydac RP-C4 10X250mm色谱柱分离制备,以两个流动相A:H2O+0.1%TFA,B:80%乙腈+0.1%TFA,用0.1~1mL/min流速,得到样品用Waters Xevo G2-XS UPLC-QTof液质联用检测。
8.如权利要求1所述的环缩酚肽在制备抑制微生物的制剂中的应用,优选的,所述的微生物是军团菌。
9.如权利要求1所述的环缩酚肽在制备治疗肺炎的药物中的应用。
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