[发明专利]榄香烯脂质体注射液半成品中耐热微生物的检验试剂盒以及方法

说明书

技术领域

本发明涉及医疗器械以及检测手段技术领域，特别是榄香烯脂质体 注射液半成品中耐热微生物的检验试剂盒及检测方法。

背景技术

榄香烯脂质体注射液结合放、化疗常规方案的方法增加了治疗肺癌、 肝癌、食道癌、鼻咽癌、脑瘤、骨转移癌等恶性肿瘤的疗效，并且降低 了放、化疗的毒副作用。同时榄香烯脂质体注射液还可用于介入、腔内 化疗及癌性胸腹水的治疗。因此，榄香烯脂质体注射液广泛应用于抗癌 治疗领域。

目前市面上流通的榄香烯脂质体注射液为乳白色的均匀乳状液体， 主要成份为β-榄香烯、γ-榄香烯以及σ-榄香烯的混合液，辅料为大 豆磷脂、胆固醇、乙醇、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠等。

依据国家标准杀灭热稳定性不好的产品中的细菌时，需要采用残存 概率法8≤F₀＜12分钟，F₀为产品在121摄氏度下的标准灭菌时间。榄香 烯脂质体注射液的灭菌方式为8≤F₀＜12分钟的残存概率杀灭法。其无菌 保证值的计算公式为SAL＝F₀/D–lgN₀，无菌保证值为产品经灭菌后微生 物残存概率的负对数。在上式中，SAL不得低于6，一个灭菌程序F₀值为 定值，所以其灭菌效果取决于灭菌前药液污染菌的数量(N₀)和其耐热性 (D)，D为在一定温度下，将微生物杀灭90％所需的时间，以分钟为单位。 现有技术对污染菌的耐热性的评估往往采用D值测定法，需采用生物指 示剂耐热性测试仪法或用毛细管油浴法，前者仪器价格昂贵，后者对人 员的要求较高，且因油浴温度较高有较大安全风险，不便于普通实验室 的日常检验操作。

发明内容

本发明解决了榄香烯脂质体注射液半成品中耐热微生物的检验试剂 盒以及方法，尤其解决了耐热微生物耐热性的快速判断方法问题，从而 使该方法更加完整、系统、科学。

本发明解决其技术问题是采取以下技术方案实现的：榄香烯脂质体 注射液半成品中耐热微生物的检验试剂盒，包含以下组分：无菌榄香烯 标准注射液以及耐热菌生物指示剂。

优选地，所述耐热菌生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌。

优选地，所述试剂盒还包括：无菌甘油溶液，无菌硫乙醇酸盐流体 培养基，无菌胰酪大豆胨琼脂培养基以及无菌胰酪大豆胨液体培养基。

优选地，所述无菌榄香烯注射液为10ml×20支；所述无菌硫乙醇酸 盐流体培养基为粉末状50-80g；所述无菌胰酪大豆胨琼脂培养基为粉末 状65-90g；所述无菌胰酪大豆胨液体培养基为粉末状50-75g；所述10-20％ (mL/mL)无菌甘油溶液40-60mL；所述耐热菌生物指示剂为10⁶cfu/ml， 10-30mL。

本发明还保护榄香烯脂质体注射液半成品中耐热微生物的检验方 法，包含下列步骤：

S1沸水浴筛选所述榄香烯脂质体注射液半成品中耐热微生物；

S2分离、鉴定并保存芽孢杆菌属的所述耐热细菌；

S3制备步骤S2所述耐热细菌的孢子液，并标定所述孢子液的浓度；

S4利用步骤S3产物制备生物指示剂，并标定所述生物指示剂的浓 度；

S5定量沸腾

S5.1取3只试管A、B、C，分别加入同体积的无菌榄香烯注射液， 取10⁵个步骤S3的产物分别置于上述装有所述无菌榄香烯注射液的所述 试管A和C中，取10⁵个步骤S4的产物置于所述试管B中。

S5.2标定所述试管A、B、C，以获得加热前各管中微生物的数量， 将B管和C管放在沸水浴中暴热处理；加热后，再标定所述试管A、B、C， 以获得加热后各管中微生物的数量；

S5.3计算每只所述试管的对数下降值。

优选地，所述步骤S1包含：

S1.1将所述榄香烯脂质体注射液半成品中耐热微生物转接于流体 培养基中进行培养取得菌液I，并将所述流体培养基在同等条件下进行培 养，作为阴性对照；

S1.2参照所述阴性对照判断所述菌液I是否浑浊。

优选地，在步骤S1.1之前，利用0.45μm的滤膜收集所述榄香烯脂 质体注射液半成品中的细菌。

优选地，步骤S2包含：