[发明专利]一种检测人尿中CD80的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种试剂盒，具体涉及一种检测人尿中CD80的试剂盒。

背景技术

CD80，又称B7-1，是最早发现的共刺激分子，为Ⅰ型跨膜糖蛋白，属于免 疫球蛋白超家族成员，以单体的形式表达于B细胞及其他抗原提呈细胞(APC) 的表面。T细胞的活化、增殖、分化继而发挥其生物学效应至少需要双重信号的 参与。第一信号是人类主要组织相容性复合体(MHC)/抗原肽/T细胞受体(TCR) 复合物，第二信号是非抗原依赖的共刺激信号(ImmunolToday,1994,15: 321-331)。后者由T细胞膜上表达的配体CD28与APC膜上表达的共刺激分子 CD80(B7-1)和CD86(B7-2)相结合而完成。CD80(B7-1)和CD86(B7-2)在T细胞活化 中的作用有何不同尚无定论，CD86常低水平表达于B细胞、巨噬细胞以及树突 状细胞的表面，抗原刺激后表达迅速上调，而CD80则为诱导性表达，生理状态 下不表达或低表达，且抗原刺激后表达上调速度慢，3-4天后表达才开始上调， 因此CD86可能作用于免疫应答初期，而CD80可能在免疫应答后期起一定的作用 (ImmunolToday,1999,20:285-288；CurrOpinCellBiol,1999,11:203-210；国际泌 尿系统杂志,2013,33:282-285)。

微小病变型肾病(MinimalChangeDisease,MCD)是肾病综合征的常见类型， 目前，其诊断依赖于肾脏活检穿刺。MCD患者的尿中CD80的水平较其他肾小球 疾病，包括局灶节段性肾小球硬化(FSGS)、急性肾小球肾炎(AGN)、膜增生性肾 小球肾炎(MPGN)、IgA肾病、膜性肾病(MN)，以及系统性红斑狼疮肾炎和正常 对照均显著增高(JAmSocNephrol,2009,20:260-266)。在MCD患者的肾脏活检 组织中发现CD80仅表达于足细胞(KidneyInt,2010,78:296-302)。因此，人尿中 CD80(B7-1)含量的检测，可为肾脏病MCD的诊断和鉴别诊断提供依据，有望改 善肾活检穿刺依赖的微小病变肾病的诊断现状。

通过国内专利检索，人尿中CD80(B7-1)的检测尚无专利授权或申报。与 CD80密切相关的专利有：①抗人CD80双价抗体及其应用：所述双价抗体由重 链可变区和轻链可变区组成，其特征在于，两者间由连接肽Gly4Ser相连，此发 明所述双价抗体与抗原的结合能力强，对Raji细胞具有明显的抑制作用，可以 用于肿瘤成像中，也可以应用在制备抑制肿瘤细胞增殖的药物中。(申请号： CN201110056304；未授权；法律状态：发明专利申请公布后的视为撤回)；②免 疫性疾病的诊断方法：包括用例如识别CD80抗原的抗人CD80单克隆抗体对分 离自人的体液中淋巴细胞和/或淋巴细胞亚群的CD80抗原阳性率进行免疫学测 定的步骤。其特征在于:可对各种免疫疾病进行简便且准确的诊断,与以前的诊断 方法相比,从患者中可分离的外周血等体液中所含有的淋巴细胞的操作简便,患 者的负担小。而且还提供了含有作为能减轻或预防免疫疾病的药物的特异性识 别CD80抗原的人抗CD80抗原抗体(申请号：CN201380047212；未授权；法律 状态：公开)。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的不足之处而提供了一种新的灵敏度 高、特异性强的检测人尿中CD80的试剂盒。

为实现上述目的，所采取的技术方案：一种检测人尿中CD80的试剂盒，所 述试剂盒包括包被有抗人CD80抗体的固相载体、酶标记的另一抗人CD80抗体、 CD80标准品、样品稀释液、洗涤液和发光底物液。

优选地，所述人尿为晨尿。其中24小时尿液或门诊随机尿次之。

优选地，所述固相载体是由聚苯乙烯制成的不透明微孔板。更优选地所述 固相载体是黑色或白色微孔板。

优选地，所述包被有抗人CD80抗体的固相载体是由以下方法制备而成的：