[发明专利]一种检测人尿中CD80的试剂盒在审
申请号: | 201610116200.2 | 申请日: | 2016-03-01 |
公开(公告)号: | CN105628935A | 公开(公告)日: | 2016-06-01 |
发明(设计)人: | 潘庆军;刘华锋;蔡珺;吴平;谢彤;杨陈;安宁;王淑君;陈锦霞;吴洪銮;李尚妹;彭艳霞;张莉芳 | 申请(专利权)人: | 广东医学院附属医院 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/545 |
代理公司: | 广州三环专利代理有限公司 44202 | 代理人: | 宋静娜;郝传鑫 |
地址: | 524000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 人尿中 cd80 试剂盒 | ||
1.一种检测人尿中CD80的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括包被有 抗人CD80抗体的固相载体、酶标二抗、CD80标准品、样品稀释液、洗涤液和 发光底物液。
2.根据权利要求1所述的检测人尿中CD80的试剂盒,其特征在于,所述 人尿为晨尿。
3.根据权利要求1所述的检测人尿中CD80的试剂盒,其特征在于,所述 固相载体是由聚苯乙烯制成的不透明微孔板。
4.根据权利要求1所述的检测人尿中CD80的试剂盒,其特征在于,所述 包被有抗人CD80抗体的固相载体是由以下方法制备而成的:
将抗人CD80抗体按照比例(抗人CD80抗体:包被液=2-10μg:1mL)的量加 入至包被液中,得到含有抗人CD80抗体的包被液,其中所述包被液为pH=9.6、 0.05M的碳酸盐;再将所述含有抗人CD80抗体的包被液按100μL/孔加入至微 孔板中,4℃放置24小时;去除包被液后,按150μL/孔加入封闭液至微孔板中, 37℃放置2~3小时,其中所述封闭液包括浓度为0.01mol/L、pH为7.2~7.4的PBS, 1%(w/v)的牛血清白蛋白,0.05%(v/v)的proclin300和5%(w/v)的蔗糖;甩掉封闭 液,拍干微孔板,室温除湿干燥24~72小时,锡箔纸封袋,置2~8℃保存。
5.根据权利要求1所述的检测人尿中CD80的试剂盒,其特征在于,所述 酶标二抗是辣根过氧化物酶标记的二抗。
6.根据权利要求5所述的检测人尿中CD80的试剂盒,其特征在于,所述 酶标二抗是由以下方法制备而成:
用戊二醛偶联法将二抗与辣根过氧化物酶偶联,再用酶标抗体稀释液稀释 至工作浓度,其中酶标抗体稀释液包括浓度为0.01mol/L、pH为7.2~7.4的PBS, 0.5%(w/v)的牛血清白蛋白和0.1%(v/v)的proclin300。
7.根据权利要求1所述的检测人尿中CD80的试剂盒,其特征在于,所述 CD80标准品为CD80重组蛋白。
8.根据权利要求1所述的检测人尿中CD80的试剂盒,其特征在于,所述 样品稀释液包括浓度为0.01~0.2mol/L、pH为5.7~7.0的PBS。
9.根据权利要求1所述的检测人尿中CD80的试剂盒,其特征在于,所述 洗涤液包括浓度为0.01~0.2mol/L、pH为7.2~7.4的PBS,和体积浓度为 0.01%~0.05%(v/v)的TritonX-100。
10.根据权利要求1所述的检测人尿中CD80的试剂盒,其特征在于,所述 发光底物液包括发光底物A液和发光底物B液,所述发光底物A液包括鲁米诺 和异鲁米诺中的至少一种以及发光增强剂,所述发光底物B液包括过氧化氢和 过氧化脲中的至少一种以及稳定剂。
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