[发明专利]一种基于AllGlo探针的VKORC1基因多态性检测分型试剂盒及其分型方法

权利要求书

1.一种基于AllGlo探针的VKORC1基因多态性检测分型试剂盒，其特征在于包括实时荧 光定量PCR试剂、阳性对照及阴性对照；

所述VKORC1(-1639A/G)为美国国家生物技术信息中心所提供人16号染色体VKORC1基 因中的SNP位点。

2.如权利要求1所述一种基于AllGlo探针的VKORC1基因多态性检测分型试剂盒，其特 征在于所述实时荧光定量PCR试剂包括以下组份：10×Taq缓冲液、10mmol的MgCl₂、5u/μL 的TaqHotstartDNA聚合酶、10mmoldNTPs混合液、50×LowROX、100mL无核酶水、10μ mol/LVKORC1(-1639A/G)的特异正向引物、10μmol/LVKORC1(-1639A/G)的特异反向引物 和AllGlo探针；10×Taq缓冲液包括100mmolTris-HCl和500mmolKCl。

3.如权利要求1所述一种基于AllGlo探针的VKORC1基因多态性检测分型试剂盒，其特 征在于所述VKORC1(-1639A/G)的特异正向引物的核苷酸序列为：

SEQIDNO.1：5＇-AAAATGCTAGGATTATAGGCGTGAG-3＇；

所述VKORC1(-1639A/G)的特异反向引物的核苷酸序列为：

SEQIDNO.2：5＇-CCAGAAGGGTAGGTGCAACAGTA-3＇。

4.如权利要求1所述一种基于AllGlo探针的VKORC1基因多态性检测分型试剂盒，其特 征在于所述AllGlo探针为VKORC1(-1639A/G)的特异探针，其核苷酸序列为：

SEQIDNO.3：VKORC1(-1639A/G)-T:MAR-CGCACCTGGCC-MAR；

SEQIDNO.4：VKORC1(-1639A/G)-C:JUP-CGCACCCGGCC-JUP。

5.如权利要求1所述一种基于AllGlo探针的VKORC1基因多态性检测分型试剂盒，其特 征在于所述阳性对照包括：阳性纯合对照品1、阳性纯合对照品2、阳性杂合对照品；所述阳 性纯合对照品1为VKORC1(-1639A/G)分型为TT的DNA样品，所述阳性纯合对照品2为VKORC1 (-1639A/G)分型为CC的DNA样品，所述阳性杂合对照品为VKORC1(-1639A/G)分型为CT的DNA 样品。

6.如权利要求1所述一种基于AllGlo探针的VKORC1基因多态性检测分型试剂盒，其特 征在于所述阴性对照为1mL的无核酶水。

7.一种基于AllGlo探针的VKORC1基因多态性分型方法，其特征在于其步骤如下：

1)采用常规方法提取EDTA抗凝全血样本中的DNA；

2)采用如权利要求1～6中任一所述一种基于AllGlo探针的VKORC1基因多态性检测分 型试剂盒提供的实时荧光定量PCR试剂将DNA进行实时荧光定量PCR扩增；

3)根据检测到的荧光信号对人VKORC1基因单核苷酸多态性位点VKORC1(-1639A/G)进 行分型。

8.如权利要求1所述一种基于AllGlo探针的VKORC1基因多态性检测分型试剂盒，其特 征在于所述AllGlo探针采用美国A1leLogicBiosciencesCorporation公司的荧光定量探 针。