[发明专利]一种半夏块茎的试管培养方法

权利要求书

1.一种半夏块茎的试管培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、消毒和接种：取半夏的幼嫩的叶、茎，洗衣粉水洗后， 自来水冲洗净，用蒸馏水加吐温-80两滴浸泡10min，在超净工作台 内用70％酒精消毒10s，漂白粉过饱和溶液上清液浸泡15min，0.05％ 砷汞浸泡4～6min，无菌水冲洗4～6次，无菌滤纸吸去表面水分， 将叶、茎切一伤口，叶分成1cm×1cm的大小，茎分为1.0～1.5cm 长的小段，再将有切口的一面接种到培养基上；

步骤2、诱导愈伤组织和芽分化及生根：在暗培养室培养5～8 天后，切口部分逐渐长出淡黄色颗粒状的愈伤组织，到第10～20天 时形成多个芽聚生在一起的芽丛，芽的基部逐渐扩大，渐渐长成带顶 芽的小块茎丛；第21～30天后，小块茎基部长出根；25～30天继代 一次；

步骤3、移栽：培养25～30天后，选取生长好的小块茎，用自 来水洗净培养基，移栽入花盆中；移栽大约12天后有苗破土，大约 4天后叶片展开，为单叶，大约7天后出现三出复叶；在移栽1个月 内长出三种叶形：单叶、三出复叶、正分化成三出复叶的单叶；挖出 块茎观察，发现块茎明显增大，并相应处于三种成形阶段：不规则块 状、圆球形、椭圆形，即移栽成功。

2.根据权利要求1所述的半夏块茎的试管培养方法，其特征在于， 所述步骤2中暗培养室培养的培养条件为：培养基MS+BA1.0mg/L+ NAA0.1～0.25mg/L在无光照条件下进行培养，诱导半夏的茎、叶形 成带顶芽的小块茎丛。