[发明专利]cry1Ia基因及应用、由其编码的Cry1Ia蛋白及制备方法和应用

权利要求书

1.一种cry1Ia基因，其特征在于，所述cry1Ia基因的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。

2.一种权利要求1所述cry1Ia基因在防治寄生线虫中的应用。

3.一种由权利要求1所述cry1Ia基因编码的Cry1Ia蛋白。

4.根据权利要求3所述的Cry1Ia蛋白，其特征在于，所述Cry1Ia蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示的序列。

5.一种权利要求3或4所述的Cry1Ia蛋白的制备方法，其特征在于，所述Cry1Ia蛋白的制备方法具体包括以下步骤：

S1、以SEQ ID NO.3所示的序列和SEQ ID NO.4所示的序列为引物，对所述cry1Ia基因进行PCR扩增得到扩增产物；

S2、将所述扩增产物与载体连接得到重组子；

S3、将所述重组子转化至大肠杆菌中得到转化子；

S4、将所述转化子进行活化、表达，得到Cry1Ia蛋白。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S4具体为：

S4-1、将所述转化子涂布于LB平板中，培养过夜得到培养液；

S4-2、将所述培养液接种于LB培养基中进行放大培养；

S4-3、加入诱导剂继续培养4～12h；

S4-4、搜集所述步骤S4-3培养得到的菌体进行超声破碎、离心得到Cry1Ia蛋白。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S4-2中将所述培养液方法培养至OD600为0.6～0.7。

8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S4-3中，所述诱导剂为异丙基-β-D-硫代半乳糖苷；所述诱导剂的浓度为0.5mM；所述步骤S4-1中所述LB平板中含有100μg/L的氨苄青霉素。

9.一种权利要求3至4中任一项所述的Cry1Ia蛋白或权利要求5至8中任一项所述制备方法制备得到的Cry1Ia蛋白在防治寄生线虫中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述寄生线虫为根结属线虫或孢囊属线虫。