[发明专利]一种提取威灵仙总皂苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种提取威灵仙总皂苷的方法，属于中草药有效成分提取分离领域。

背景技术

威灵仙，属毛莨科植物。在临床上，它用于治疗痛风顽痹、肢体麻木、筋脉拘挛、减弱风湿痹痛、诸骨鲠咽，减少水肿、降血压和治疗外伤等。有关威灵仙的化学成分，近年来陆续有一些报道，但研究主要集中威灵仙的大极性组分。此外，从威灵仙的根部提取物中分离得到一系列三萜苷。威灵仙中所发现的大多数皂苷的苷元均为齐墩果酸，其总皂苷具有抗肿瘤及抗炎镇痛的作用。

目前，对威灵仙的研究主要集中在总皂苷药理作用上，对其总皂苷的提取方法研究较少。皂苷提取常用的方法有：常规加热回流提取法、索氏提取法、渗漉提取法等。对提取威灵仙总皂苷来讲，都有其局限性，如索氏提取就很难控制提取液溶剂浓度的改变；渗漏提取又无法控制提取温度的改变；而加热回流提取法虽可控制提取溶剂浓度，但只有经过2次或3次提取才能较完全的提出皂苷，需要较多的提取溶剂，且提取时间较长。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种提取威灵仙总皂苷的方法，该方法具有工艺简单、能耗低、生产周期短等特点。

本发明包括以下步骤：

（1）以威灵仙为原料，干燥、粉碎，过20目筛，加入3~5倍的pH为4.0~5.0的乙醇溶液，将相当于原料1~2%的纤维素酶加入其中，于40~50℃酶解2~3h；

（2）将酶解后的物料置于连续逆流超声装置中，于70~80℃、20~40KHz的条件下提取60~120min，过滤；

（3）将提取液用滤布孔径为50~1.0μm板框机过滤，其中压力为0.1~1.0MPa，板框机过滤后的液体经0.2~0.02μm的微滤装置进行微滤，其中保持微滤装置压力为0.1~0.6MPa；

（4）微滤透过液经过预处理的0.5~1.5倍原料重量的大孔吸附树脂柱后，用2~3BV的蒸馏水洗脱，再改用4~6BV的60~80%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩并真空干燥，得到威灵仙总皂苷。

步骤（1）中所述的调节乙醇溶液的酸为乙酸。

步骤（4）中所述的大孔树脂型号为AB-8、D-101、NKA-9。

本发明的有益效果在于：（1）采用纤维素酶处理，能破坏植物的细胞壁，有利于有效成分的溶出，大大缩短处理时间，提高生产效率；（2）采用连续逆流超声提取，利用超声的空化作用，加速威灵仙总皂苷的溶出；（3）本发明操作方便，工艺简单，得率高，且生产安全可靠。（4）该法工艺简单、能耗低、萃取溶剂无毒、易回收。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

以威灵仙为原料，干燥、粉碎，过20目筛，加入3倍的pH为4.0的乙醇溶液，将相当于原料1%的纤维素酶加入其中，于40℃酶解2h；将酶解后的物料置于连续逆流超声装置中，于70℃、20KHz的条件下提取60min，过滤；将提取液用滤布孔径为50μm板框机过滤，其中压力为1.0MPa，板框机过滤后的液体经0.2μm的微滤装置进行微滤，其中保持微滤装置压力为0.6MPa；微滤透过液经过预处理的0.5倍原料重量的AB-8的大孔吸附树脂柱后，用2BV的蒸馏水洗脱，再改用4BV的60%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩并真空干燥，得到威灵仙总皂苷，含量为67.8%。

实施例2：

以威灵仙为原料，干燥、粉碎，过20目筛，加入5倍的pH为4.5的乙醇溶液，将相当于原料2%的纤维素酶加入其中，于45℃酶解3h；将酶解后的物料置于连续逆流超声装置中，于75℃、40KHz的条件下提取90min，过滤；将提取液用滤布孔径为30μm板框机过滤，其中压力为0.5MPa，板框机过滤后的液体经0.02μm的微滤装置进行微滤，其中保持微滤装置压力为0.3MPa；微滤透过液经过预处理的1倍原料重量的D-101的大孔吸附树脂柱后，用3BV的蒸馏水洗脱，再改用6BV的70%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩并真空干燥，得到威灵仙总皂苷，含量为76.5%。

实施例3：

以威灵仙为原料，干燥、粉碎，过20目筛，加入4倍的pH为5.0的乙醇溶液，将相当于原料1.5%的纤维素酶加入其中，于50℃酶解3h；将酶解后的物料置于连续逆流超声装置中，于80℃、40KHz的条件下提取120min，过滤；将提取液用滤布孔径为1.0μm板框机过滤，其中压力为0.1MPa，板框机过滤后的液体经0.1μm的微滤装置进行微滤，其中保持微滤装置压力为0.1MPa；微滤透过液经过预处理的1.5倍原料重量的NKA-9大孔吸附树脂柱后，用3BV的蒸馏水洗脱，再改用5BV的80%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩并真空干燥，得到威灵仙总皂苷，含量为71.2%。