[发明专利]一种肠杆菌属菌株CV‑v降解孔雀石绿的方法

说明书

技术领域

本发明属于污水中染料降解技术领域，具体的说，涉及一种肠杆菌属菌株CV-v降解孔雀石绿的方法。

背景技术

孔雀石绿(Malachite Green,MG)，是一种极易溶于水的三苯甲烷类染料，可广泛应用于印染、食品加工、医药、水产养殖和工业等各个领域中，尤其在水产养殖中，孔雀石绿可作为驱虫剂、杀虫剂、防腐剂广泛用于预防与治疗水霉病、鳃霉病和小瓜虫病等。但其广泛使用造成的负面效应，如对哺乳动物细胞、水生生物和其他有机生命体的致癌致畸效应，也凸现出来，引起了科学界的广泛关注。因此，美国、日本、英国等许多国家和地区，立法严禁使用孔雀石绿，且该染料已被美国食品和药物管理局(US Food and Drug Administration)列为致癌性测试的优先化学物质之一，也被我国列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中，禁止用于所有食品动物。孔雀石绿在水生生物体中的主要代谢产物为隐性孔雀石绿(1eucomalachite green，LMG)，其残留毒性比孔雀石绿更强，对人们的健康构成了潜在的巨大威胁。

由于孔雀石绿本身或其降解产物的生物毒性较大，尽管许多科学工作者已致力于解决由孔雀石绿造成的环境污染问题，例如应用吸附、化学沉淀、光降解、渗透和膜过滤等理化处理技术处理污染水源；然而，由于这些处理方法不仅处理费用高、效率低，而且在治污的同时容易产生二次污染和难以处置的底泥，因此，极大地限制了其广泛推广使用。生物处理技术作为一种环境友好型且高效低耗的处理手段而受到越来越广泛的关注。其中，细菌由于生长速度快，容易获得大量生物量，且易产生大量降解相关酶，对染料的降解效率也较高等优势而受到环境工作者的青睐。

以往的研究显示，很多微生物被从环境中分离出来，测试其对孔雀石绿的降解行为，这些微生物包括Chlorella sp.、Shewanella sp.和Pseudomonas sp.等。已分离的菌株对孔雀石绿的降解行为各异，但总体而言，降解效率仍差强人意，因此，仍有必要广泛筛选孔雀石绿高效降解菌株，并研究其降解行为等。同时，环境温度等因素对细菌降解孔雀石绿的降解效果影响较大。然而，环境温度往往随季节变化显著，以浙江省为例，全省全年最低气温可达零下3度以下，最高可达40度以上，加之实际含染料废水或过酸或过碱，这些因素极大地限制了实验室筛选出的高效降解菌株在实践中的应用。要解决这一问题，就必须加强筛选环境适应性更强或能更好的适应本地环境的高效降解菌株的研究。

发明内容

为解决以上技术问题，本发明的目的之一在于提供一种肠杆菌属菌株CV-v，该菌株能高效降解污水中的孔雀石绿。

本发明的目的之二在于提供一种肠杆菌属菌株CV-v降解孔雀石绿的方法，能最大化的发挥出菌株CV-v降解孔雀石绿的作用。

本发明目的之一通过提供一种肠杆菌属(Enterobater sp.)菌株CV-v来实现，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO:M 2015177。

本发明目的之二是这样实现的一种肠杆菌属菌株CV-v降解孔雀石绿的方法，其关键在于由以下步骤组成：a、培养菌株：将菌株CV-v接种于LB培养基中，在30℃条件下，于转速为180rpm的摇床中培养12-18h，以获得大量菌体；b、将经扩大培养后的菌体培养物，将干重为0.1-0.2g/L的菌体接种于孔雀石绿染料浓度为1000mg/L或以下的污染水体中，并震荡培养6h以上，脱色pH范围为3.0-10.0，温度范围为10-50℃。

优选地，上述步骤b中孔雀石绿染料浓度为600mg/L以下，震荡培养时间为6h。

优选地，上述步骤b中孔雀石绿染料浓度为500mg/L以下。

优选地，上述步骤b中温度范围为20～50℃。

优选地，上述步骤b中震荡培养的转速为180rpm。

优选地，上述步骤a中LB培养基由蛋白胨10g/L、酵母粉5g/L、氯化钠10g/L配制而成。

一、肠杆菌属(Enterobater sp.)菌株CV-v

一种肠杆菌属(Enterobater sp.)菌株CV-v，于2015年3月29日在中国典型培养物保藏中心进行保藏，保藏编号为CCTCC NO:M 2015177。