[发明专利]一种检测微囊藻毒素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，尤其涉及一种检测微囊藻毒素的 方法。

背景技术

近年来，藻类作为人类保健食品添加剂已得到了大力发展，与其 相关的食品安全问题也因此提上日程。但藻类中可能含有一种次生代 谢产物--微囊藻毒素，该微囊藻毒素为七肽单环肝毒素，能够强烈抑制 蛋白磷酸酶的活性，是强烈的肝脏肿瘤促进剂，其对水体环境和人群 健康的危害已成为全球关注的重大环境问题之一。因此，准确检测藻 类中微囊藻毒素的含量显得尤为重要。

目前，现有技术中常用的液相色谱检测法，通常选用腈、水和有 机酸的混合液作为流动相进行检测，但该流动相容易因外界环境的干 扰或因有机相的挥发而导致自身pH改变，因此现有技术的流动相提供 的检测环境稳定性较差，而且，微囊藻毒素通常以痕量形式存在，更 易于受到检测环境的影响，导致检测结果不准确，此外，流动相中腈 的毒性较大，对人体及环境危害相对较大。

发明内容

本发明实施例提供了一种检测微囊藻毒素的方法，检测结果准确， 且环境友好。

为达到上述目的，本发明提供一种检测微囊藻毒素的方法，所述 方法包括：

对样品中的微囊藻毒素进行提取；

对提取后所得的微囊藻毒素进行预处理；

以醇和有机酸盐缓冲液的混合液为流动相对所述预处理后的微囊 藻毒素进行液相色谱检测。

其中，所述醇包括甲醇、乙醇、异丙醇中的任意一种或几种；所 述有机酸盐缓冲液包括甲酸盐水溶液、醋酸盐水溶液或磷酸盐水溶液 中的任意一种。

优选地，所述醇为甲醇，所述有机酸盐缓冲液为磷酸盐水溶液。

具体地，所述甲醇与所述磷酸盐水溶液的体积比为50:50～60:40； 所述流动相的pH为2.5～3.5。

优选地，所述流动相中，所述甲醇与所述磷酸盐水溶液的体积比 为57:43；所述流动相的pH为3。

优选地，以醇和有机酸盐缓冲液的混合液为流动相对所述预处理 后的微囊藻毒素进行液相色谱检测时，可检测到的微囊藻毒素的浓度 为0.01～10μg/L。

其中，所述对样品中的微囊藻毒素进行提取包括：

a、将样品溶于有机酸溶液；

b、超声振荡提取，得到微囊藻毒素。

优选地，所述有机酸溶液的浓度为3％～10％，所述有机酸溶液与 样品的比例为30mL/g～70mL/g。

进一步地，所述对提取后所得的微囊藻毒素进行预处理具体包括： 对提取后所得的微囊藻毒素进行萃取富集。

具体地，所述对提取后所得的微囊藻毒素进行萃取富集包括：

A、对提取后所得的微囊藻毒素进行萃取；

B、对萃取过程中吸附的微囊藻毒素进行洗脱，其中，所述洗脱为 先用水进行洗脱，再用醇溶液进行梯度洗脱。

优选地，所述用醇溶液进行梯度洗脱时，所述醇溶液的浓度范围 为20％～100％，所述梯度洗脱达到回收率不低于90％。

优选地，所述用醇溶液进行梯度洗脱时，以等体积的醇溶液进行 梯度洗脱。

本发明实施例提供了一种检测微囊藻毒素的方法，应用液相色谱 法对微囊藻毒素进行检测分析，在分析过程中使用醇和有机酸盐缓冲 液的混合液作为流动相，相比现有技术中以腈、水和有机酸的混合液 为流动相，一方面，该流动相不会因外界环境的干扰或因有机相的挥 发而导致自身pH改变，且有机酸盐缓冲液抑制了溶质的质子化，为检 测微囊藻毒素提供稳定的pH环境，有效避免检测环境对微囊藻毒素的 检测结果的影响，提高了检测结果的准确性，另一方面，醇对微囊藻 毒素具有很好的溶解性且环境友好。

附图说明

图1为本发明实施例提供的一种检测微囊藻毒素的方法的流程示 意图；

图2为本发明实施例提供的微囊藻毒素-RR(MC-RR)标准品的色 谱图；

图3为本发明实施例提供的微囊藻毒素-LR(MC-LR)标准品的色 谱图；

图4为本发明实施例提供的来自藻粉中的微囊藻毒素样品的色谱 图。

具体实施方式