[发明专利]一种定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素O、抗环瓜氨酸肽抗体、C反应蛋白的检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及生物检测领域，特别是涉及一种定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素O、抗环瓜氨酸肽抗体、C反应蛋白的检测试剂盒及其制备方法和用途。

背景技术

类风湿因子(rheumatoid factor,RF)可分为IgM、IgA、IgG、IgD、IgE五型(注：在临床内科学中描述为四型，没有IgD型；但在实验室诊断学中描述为5型)，是类风湿关节炎血清中针对IgG FC片段上抗原表位的一类自身抗体，类风湿因子阳性患者较多伴有关节外表现，如皮下结节及血管炎等。IgM型RF阳性率为60％-78％。

机体因咽炎、扁桃体炎、猩红热、丹毒、脓皮病、风湿热等感染A组链球菌后，可产生链球菌溶血素O抗体，即“Anti-Streptolysin O(ASO)”。

抗环瓜氨酸肽抗体(CCP)是环状聚丝蛋白的多肽片段，是以IgG型为主的抗体，对类风湿性关节炎(RA)具有很好的敏感性和特异性，且抗CCP抗体阳性的RA病人骨破坏较抗CCP抗体阴性者严重。类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种常见的慢性自身免疫性疾病。在全世界大约有1％的人罹患此病。RA能引起关节的疼痛、僵直及肿胀。在发病2年内即可能出现不可逆的骨关节损伤，并可引起多种并发症，如神经系统疾病、心包炎、淋巴腺炎等。因此，及早诊断RA及给予缓解病情的药物治疗，对控制病情非常重要。1998年，国外，首次报道的抗环瓜氨酸肽抗体(anti-cyclic cirullinated peptide antibodies,抗CCP抗体)的检测，对RA具有较高的敏感性和特异性，是RA新的血清标志物。

人类C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)是指在机体受到感染或组织损伤时血浆中一些急剧上升的蛋白质(急性蛋白)。CRP可以激活补体和加强吞噬细胞的吞噬而起调理作用，从而清除入侵机体的病原微生物和损伤，坏死，凋亡的组织细胞，在机体的天然免疫过程中发挥重要的保护作用。关于CRP的研究已经有70多年的历史，传统观点认为CRP是一种非特异的炎症标志物，但近十年的研究揭示了CRP直接参与了炎症与动脉粥样硬化等心血管疾病，并且是心血管疾病最强有力的预示因子与危险因子。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种定量检测类风湿因子、抗链球菌溶血素O、抗环瓜氨酸肽抗体、C反应蛋白的检测试剂盒及其制备方法和用途，用于解决现有技术中的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种定量检测类风湿因子(RF)、抗链球菌溶血素O(ASO)、抗环瓜氨酸肽抗体、C反应蛋白(CRP)的检测试剂盒，包括互相独立的类风湿因子检测试纸卡、抗链球菌溶血素O和C反应蛋白检测试纸卡，所述类风湿因子检测试纸卡、抗链球菌溶血素O和C反应蛋白检测试纸卡均各自包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、荧光标记物结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述类风湿因子检测试纸卡的荧光标记物结合垫上包含人变性IgG，所述抗链球菌溶血素O检测试纸卡的荧光标记物结合垫上包含链球溶菌素O(SLO)，所述抗环瓜氨酸肽抗体检测试纸卡的荧光标记物结合垫上包含环瓜氨酸肽，所述C反应蛋白检测试纸卡的荧光标记物结合垫上包含C反应蛋白单克隆抗体，所述各硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线，所述荧光标记物结合垫上的链球溶菌素O、人变性IgG、环瓜氨酸肽、C反应蛋白单克隆抗体采用荧光微球标记。

优选的，所述荧光标记物结合垫上的链球溶菌素O、人变性IgG、C反应蛋白单克隆抗体采用180nm荧光微球标记，EX(nm)＝650/Em(nm)＝670，具有信号受背景干扰小，检测灵敏度高，结果重复性好的优点。

优选的，为了使得试剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果，本发明中所述的荧光标记物结合垫还经过预处理，预处理中所使用的预处理缓冲液包括下列组分：水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠和甘氨酸，且水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠、甘氨酸的总浓度为3.5－7.5g/L，缓冲液的pH值为7.2－7.6。

优选的，各组分在缓冲液中的浓度为：

所述预处理缓冲液的溶剂为水。

所述预处理的具体步骤为：将荧光标记物结合垫在预处理液中浸泡1.5-2.5h，取出放于36-38℃烘干。

所述预处理缓冲液可使用本领域各种常用的pH调节剂进行pH值的调节。

优选的，所述底板为PVC底板。