[发明专利]运载阿霉素的靶向性脂质二氧化硅复合体及制备和应用

说明书

技术领域

本发明是复合型医药材料制备和应用，涉及一种包埋药物的颗粒型材料，是脂质体技术与无机颗粒载体技术的交叉应用。

背景技术

脂质体作为药物载体，具有进入体内被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能，改变被包封药物的体内分布、使药物在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中蓄积、从而提高药物的治疗指数、减少药物治疗剂量和降低药物的毒性。然而，脂质体体系是由磷脂、胆固醇等组成的热力学不稳定体系，弱稳定性限制了它的使用，影响其作为药物载体的应用。脂质体在存储期间，磷脂易氧化水解，膜层易相变，小粒径脂质体易相互聚集融合，包裹其中的药物易发生泄漏。二氧化硅是一种具有良好生物兼容性的材料，通过控制前体硅酸四乙酯水解反应制备不同形貌的二氧化硅纳米粒子（如介孔二氧化硅和二氧化硅空心球），实现作为药物载体的用途。

阿霉素作为临床使用频繁的化疗药物，具有抗癌谱广、化疗指数高，其副作用存在有骨髓移植、恶心、呕吐、脱发、高热等症状，累计剂量大时会发生心肌坏死甚至充血性心力衰竭。使用二氧化硅材料包埋阿霉素药物形成的纳米药物具有缓释功能，延长药物作用时间，增加在体内的半衰期，保护被包埋的药物分子不受体内酶的破坏，增强生物相容性等特点。靶向性脂质体是指在脂质体表面联接识别分子（如Lyp-1、RPARPAR、RGERPPR和angioprep-2等），通过识别分子特异性专一地与靶细胞表面的互补相互作用，将脂质体转运到靶区释放药物。

本发明解决的技术问题是靶向脂质体载体稳定性弱，易氧化的问题。SiO₂作为内壳层，靶向脂质体作为外壳层复合包载阿霉素的途径，提供一种具有靶向指向作用的稳定性好、生物相容性高、缓释时间长、载药量大、药物包裹效率高的包覆方法, 同时工艺简单、成本低的优点。复合结构克服脂质体不稳定的特点，同时又能发挥靶向性脂质体细胞靶向的功能。

发明内容

本发明针对脂质体包封药物稳定性的不足，使用硅酸四乙酯水解后形成的二氧化硅壳层包载水溶性药物分子，而后靶向性脂质分子物理吸附于药物颗粒表层形成复合结构，并使其具有特定的组织靶向性。

一种运载阿霉素的靶向性脂质/二氧化硅复合体的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

（1）二氧化硅颗粒包埋阿霉素药物：

将10体积的环己烷、2.2～2.6体积的聚乙二醇对异辛基苯基醚和2.0～2.4体积的正己醇混合均匀，向混匀后的混合液中加入0.5～1体积、浓度为10-20mg/mL的氟化钠溶液，搅拌均匀后形成反乳相微乳液；向该反相微乳液中加入0.1 ～0.13 体积、0.01～0.05mol/L 的阿霉素溶液和0.13～0.27 体积的正硅酸乙酯(TEOS)，反应完全后得到包埋阿霉素的二氧化硅纳米颗粒(DOX-SiNP) 微乳液体系；在破乳前加入0.02～0.05的氨丙基三乙氧基硅烷，室温下搅拌至反应完全；然后加入乙醇破乳，离心收集纳米颗粒，洗涤后制得包埋药物阿霉素的SiO₂纳米颗粒；

（2）靶向性脂质体的制备：

将肿瘤细胞穿膜肽溶于PH7.0的2毫升PBS溶液中，取马来酰亚胺-聚乙二醇-磷脂复合物（DSPE-PEG-MAL），其摩尔当量为肿瘤细胞穿膜肽的0.8倍，溶于0.5毫升二甲基甲酰胺（DMF），加入多肽水溶液中，超声去除气泡，搅拌反应1小时至DSPE-PEG-Mal反应完全，透析，截留分子量3500Da，透析介质为水，去除过量的肿瘤细胞穿膜肽和DMF，冷冻干燥，得到肿瘤细胞穿膜肽-PEG-DSPE材料；将处方的摩尔组成为氢化大豆磷脂/胆固醇/ mPEG-DSPE/RGERPPR-PEG-DSPE=55:45:2:1，将各组分用氯仿溶解，旋转蒸发去除溶剂，加水溶液至脂质膜中，超声分散并在水浴60度旋转震荡，得脂质体混悬液；挤压过50nm孔径大小的碳酸脂膜，得到粒径大小均匀的靶向性脂质体；

（3）靶向性脂质/SiO₂复合体的制备：

将上述两种溶液混合，脂质与二氧化硅治疗比为1:10，后经漩涡震荡5分钟后，静止放置24小时，经12000rpm离心后除去上层游离的脂质层，将沉淀部分冷冻干燥，既得靶向性脂质/SiO₂复合体。

所述的肿瘤靶向细胞穿膜肽为C-RGERPPR，Lyp-1，RPARPAR，RGERPPR，cRGD，NGR，angioprep-2中的一种或其组合。

一种运载阿霉素的靶向性脂质/二氧化硅复合体，其特征在于，根据上述任一权利要求所述方法制备得到。