[发明专利]一种草果与草豆蔻的指纹图谱鉴别方法

权利要求书

1.一种草果与草豆蔻的指纹图谱鉴别方法，其特征在于该法是一种采用溶剂超声辅助萃取或冷浸提取制备供试液，采用GC-MS方法在一定条件下测得指纹图谱并用于鉴别的方法，具体包括以下测定条件及步骤：

(1)供试品溶液的制备：取草果和草豆蔻药材粉末4-6克，精密称定，分置于两个锥形瓶中，分别加入萃取溶剂20-30ml，冷浸24小时或超声辅助萃取30-40分钟，放冷，加萃取溶剂补足失去的重量，过滤，取续滤液置离心管中，用无水硫酸钠干燥去除水分，以13000r/min离心10分钟，取上清液，即得草果和草豆蔻药材的供试品溶液；

(2)色谱分析条件：HP-5MS UI弹性石英毛细管色谱柱，其规格为30m×0.25mm×0.25μm；载气为高纯He，纯度≥99.99％，流量1.0ml/min；进样口温度250℃；不分流进样；程序升温程序为：初始温度80℃，保持3min，以6℃/min升至180℃，保持3min；

(3)质谱分析条件：电离方式为EI，电子能量70eV，检测器温度280℃，离子源温度230℃，四级杆温度150℃，倍增电压1782v，发射电流34.6μA，扫描质量范围：50-500amu；溶剂延迟3.0min；

(4)测定法：分别取草果和草豆蔻的供试液各1μl，注入GC-MS联用仪，测定草果和草豆蔻的总离子流图，即得两药材的GC-MS指纹图谱；

(5)标准指纹图谱的建立：测定10批不同产地草果与草豆蔻的GC-MS指纹图谱，应用计算机对指纹图谱的数据进行分析对比，计算得出草果与草豆蔻的GC-MS指纹图谱的共有模式，作为草果与草豆蔻药材的鉴别用标准指纹图谱；

(6)应用：将待测样品的GC-MS指纹图谱分别与草果与草豆蔻药材的标准指纹图谱进行对比，根据特征指纹峰位及主要特征峰面积的大小，即可确定药材的品种与质量。

2.如权利要求1所述的指纹图谱鉴别方法，其特征在于所述的萃取溶剂是乙酸乙酯、二氯甲烷或石油醚。

3.如权利要求1所述的指纹图谱鉴别方法，其特征在于所述的最佳萃取溶剂为乙酸乙酯，所需最佳萃取溶剂量为药材的4-5倍，超声萃取时间为30分钟。

4.如权利要求1所述的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：草果指纹图谱共有模式中具有16个共有特征峰，各特征峰对应的化学成分分别是：1号峰：α-蒎烯，2号峰：β-蒎烯，3号峰：α-水芹烯，4号峰：桉油精，5号峰：α-松油醇，6号峰：顺式-柠檬醛，7号峰：香叶醇，9号峰：反式-柠檬醛，10号峰：trans-2，3，3α，7α-tetr-ahydro-1H-indene-4-carbaldehyde，11号峰：cis-2，3，3α，7α-tetr-ahydro-1H-indene-4-carbaldehyde，12号峰：2，3-二氢-1H-茚-4-甲醛，13号峰：乙酸香叶酯，14号峰：顺式-环癸烯，15号峰：反式-2-十二烯醛，16号峰：橙花叔醇，其中以桉油精的相对含量为最高；草豆蔻指纹图谱共有模式中具有13个共有特征峰，各特征峰对应的化学成分分别是1号峰：α-蒎烯，2号峰：莰烯，3号峰：α-水芹烯，4号峰：对-聚伞花烃，5号峰：桉油精，6号峰：樟脑，7号峰：L-(-)-龙脑，8号峰：(-)-4-萜品醇，9号峰：4-苯基-2-丁酮，10号峰：反式-桂皮醛，11号峰：α-石竹烯，12号峰：δ-杜松烯，13号峰：金合欢醇；其中以金合欢醇的相对含量为最高。

5.权利要求1所述的指纹图谱鉴别方法在草果和草豆蔻药材的鉴别与质量控制方面的应用。