[发明专利]一种谷物蛋白质的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种谷物蛋白质的测定方法。

背景技术

蛋白质是决定谷物食用品质的一个重要指标，目前常用的国家标准方法采用浓H₂SO₄—催化剂消煮，凯氏定氮法测定。但该方法存在以下不足：浓H₂SO₄—催化剂消煮和凯氏定氮这两个过程耗时费时间均较长，操作繁琐，消煮催化剂用量多。在生产和科研中，为完成大批样品的测定，需要采用快速、简易的分析方法。目前，文献报道中有许多谷物蛋白质的快速测定方法，例如双缩脲比色法、染料结合法、水合茚三酮法。

发明内容

本发明的目的在于克服目前国家标准方法中的不足，再为谷物蛋白质的测定提供一种比较准确、快速、易于操作的方法。本发明采用浓H₂SO₄-H₂O₂消煮，用浓H₂SO₄和H₂O₂将谷物中碳水化合物转化为二氧化碳和水，将蛋白质中的氮转化为铵态氮，消煮液中的铵态氮用纳氏比色法测定。与国家标准方法相比，本方法具有以下优点：(1)国家标准方法中，采用浓H₂SO₄—催化剂消煮，催化剂用量较多，本方法无需用催化剂，从而降低了分析成本，同时消煮时间可缩短1/3。(2)在大批样品的测定中，国家标准方法中，凯氏定氮法耗时较长，用水量较多，纳氏比色法不但节约了时间，还节约了成本。

本发明的技术方案为：

一种谷物蛋白质含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)称取0.1000-0.3000g的水稻样品置于50ml消化管中，加5ml浓H₂SO₄，置于远红外消煮炉中，于80-100℃加热，待浓H₂SO₄分解冒白烟升高温度，直至溶液转为棕黑色；

(2)取下冷却1－5分钟，滴加300g/L H₂O₂5－10滴，摇匀，于远红外消煮炉上加热5-10min，取下冷却1－5分钟，滴加300g/L H₂O₂5－10滴摇匀，于远红外消煮炉上加热5-10min，如此反复直至消煮液呈无色或清亮色后，再加热5-10min，即消煮完毕，将消煮液转移至100ml容量瓶中，定容后过滤；

(3)配制标准曲线：分别吸取10ug/ml氮(NH₄⁺-N)标准溶液0.0、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10ml于50ml比色管中，加1ml的500g/L酒石酸钾钠溶液，摇匀后再加入1ml纳氏试剂，摇匀；放置10min，在波长420nm处比色；以吸光度为为横坐标，相应的氮含量(ug)为纵坐标，绘制标准曲线；

(4)准确吸取1ml滤液于50ml比色管中，加适量水，用NaOH溶液调至中性，加1ml 500g/L酒石酸钾钠溶液，再加1ml纳氏试剂，定容后摇匀，10min后于420nm比色；谷物蛋白质的计算公式为：

式中：

ρ—从标准曲线查得显色液N的含量(ug)；

ts—分取倍数，消煮液定容体积(ml)/吸取消煮液体积(ml)；

k—氮换算成蛋白质的系数，水稻系数为5.95，玉米系数为6.25，燕麦系数为5.83；

m—样品质量(g)。

本发明采用浓H₂SO₄-H₂O₂消煮，H₂O₂的加入方式为取下冷却1－5分钟后，逐滴加入300g/L H₂O₂10滴，摇匀，再加热10min，取下冷却1－5分钟后，再加H₂O₂5-10滴，如此反复2-3次，直至消煮液呈无色或清亮色。

滴加H₂O₂应直接滴入瓶底，防止其分解，失去氧化效果。

本方法对谷物蛋白质的测定比较准确、且易于操作、既经济又省时。

具体实施方式

结合实施例对发明作进一步描述。

实施例1：一种谷物蛋白质的测定方法