[发明专利]一种昆仑雪菊原花青素的提取方法及在延缓衰老中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及原花青素的提取制备的技术领域。具体的说，本发明涉及一种从昆仑雪菊原花青素的提取方法及其应用的制备技术领域。

背景技术

新疆昆仑雪菊，学名为两色金鸡菊(Coreopsis tinctoria)是菊科金鸡菊属一年生草本植物的干燥头状花序．在新疆主要分布于和田地区海拔高3000米左右的昆仑山区，有较丰富的野生资源。长期以来，昆仑雪菊被当地居民当花茶饮用，新疆维吾尔医院也作为一种维药材应用．具有清热解毒、活血化瘀、和胃健脾之功，用花泡茶饮，可治疗燥热烦渴、高血压、心慌、胃肠不适、食欲不振、痢疾及疮疖肿毒，是具有广阔前景和研究价值的新品种。作为药食两用资源，昆仑雪菊在近几年已经成为市场的卖点，已成为人们的高档馈赠礼品。关于昆仑雪菊黄酮研究较多，而对昆仑雪菊原花青素的研究鲜见报道。

原花青素(Procyanidins，PC)是一种黄烷-3-醇或黄烷-3,4-二醇聚合而成的一大类多酚化合物的总称，是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂。原花青素还具有保护心血管、预防高血压、抗肿瘤、抗辐射、抗突变、美容等，并具有改善人体微循环的功能。原花青素作为植物中一类普遍的次级代谢产物同花色素、生物黄酮等物质一样广泛分布于各种植物的种子、叶子、果实、花和皮、壳等处，目前国内外多从葡萄籽中提取原花青素，其次是从松树皮中提取。而以昆仑雪菊花作为提取原花青素原料，研究其提取方法和含量的文章还未见报道。

动态超高压微射流（DHPM）是一种特殊形式的高压均质技术，它利用高压使液体物料高速流过狭窄的缝隙时受到强大的剪切力、撞击力以及空穴爆炸力等综合作用，使细胞破碎、促进细胞内容物溢出，从而提高有效成分的提取率的过程。目前已有学者研究了DHPM在提取和大分子改性方面的应用，如对马铃薯叶中总黄酮提取及活性影响、木瓜蛋白酶活性的影响、脂肪酸脂质体的制备、对胰蛋白酶的活性、稳定性和构象的影响等，但尚无关于将DHPM技术运用于雪菊原花青素提取的相关研究报道。

发明内容

针对现有技术中未见有关将DHPM技术运用于雪菊原花青素提取的研究和报道，本发明需要解决的技术问题就在于克服现有技术的缺陷，旨在提供一种昆仑雪菊原花青素的提取方法及在延缓衰老中的应用，制备的原花青素的总抗氧化活性也比抗坏血酸高，结合果蝇生存实验和体内生化指标测定结果说明原花青素具有延缓果蝇衰老功效，具有广泛的应用价值。

本发明提供的技术方案：

本发明以生长在海拔2600米以上的昆仑雪菊花为原料，采用动态超高压微射流辅助提取技术从中提取出雪菊原花青素，优化提取工艺，并对提取物进行抗氧化、延缓果蝇衰老作用及对CCl4诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用的研究，确定了从昆仑雪菊中提取原花青素在延缓衰老中的应用具有良好的效果；制备的原花青素的总抗氧化活性也比抗坏血酸高，是一种天然的抗氧化剂，结合果蝇生存实验和体内生化指标测定结果说明原花青素具有延缓果蝇衰老功效；通过小鼠肝损伤实验表明，从从昆仑雪菊中提取原花青素可降低血清ALT和AST活性，对CCl4致小鼠肝损伤有一定的保护作用，应用从从昆仑雪菊中提取原花青素具有良好的延缓衰老功效，具有广泛的应用价值。

本发明具体提供一种昆仑雪菊原花青素的提取方法，%按照重量百分比计，具体提取方法步骤如下：

（1）生长在海拔2600米以上的昆仑雪菊花为原料，将烘干后的雪菊粉在粉碎机中粉碎后过40目筛。

（2）用石油醚对雪菊粉脱脂8小时并在50℃烘干2h。

（3）乙醇浸润：料液比按重量比1:40配置的70%乙醇提取液放置于4℃冰箱中静置过夜。

（4）预均质：使用均质压力为30MPa,均质2次。

（5）动态超高压微射流处理：采用一定微射流压力处理2次；提取压力120MPa，提取温度50℃，乙醇浓度70%，提取时间30min。

（6）乙醇回流：以60%乙醇浓度，提取时间2.5 h，提取温度60 ℃，回流提取2次，离心并合并滤液，经过旋转蒸发工艺，蒸发温度30℃，转速40rpm。

（7）大孔树脂纯化：AB-8大孔树脂纯化最优条件为原花青素上样浓度为1.06mg/mL、上样pH=6、上样流速为2BV/h，用4倍柱床体积70%的乙醇以流速为2BV/h洗脱；经过旋转蒸发工艺，蒸发温度30℃，转速40rpm；纯化后昆仑雪菊原花青素的纯度为66.76%。

（8）采用真空冷冻干燥，冷凝温度－50℃，真空度<20Pa条件下制备获得昆仑雪菊原花青素浓缩粉。