[发明专利]一种β-葡萄糖苷酶交联聚集体催化合成红景天苷的工艺

权利要求书

1.一种β-葡萄糖苷酶交联聚集体催化合成红景天苷的工艺，其特征在于：包括β-葡萄糖苷酶交联聚集体的制备和红景天苷的合成两个阶段；β-葡萄糖苷酶交联聚集体制备阶段，包括以下步骤：

（1）将沉降剂加入β-葡萄糖苷酶溶液中，振荡；

（2）再加入戊二醛；

（3）向混合液中加入硼氢化钠，振荡后，300~500rpm离心5~10min，收集沉淀，即为β-葡萄糖苷酶交联聚集体；

红景天苷的合成阶段，包括以下步骤：

（4）将β-D-葡萄糖和对羟基苯乙醇溶解于含β-葡萄糖苷酶交联聚集体的pH 为5.5~6.5的缓冲溶液中，再加入1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、仿水溶剂和1,4-二氧六环，形成1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐/仿水溶剂/1,4-二氧六环/缓冲溶液反应体系，仿水溶剂为乙酸乙酯；（5）密封，保持温度为48~52℃，转速为245~255 rpm，反应5~9d，收集反应液；

其中，步骤（4）的1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐/仿水溶剂/1,4-二氧六环/缓冲溶液反应体系中，β-D-葡萄糖与对羟基苯乙醇的摩尔比为1:1~1:3，1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐的单位酶活为1.3~1.6U/ml ， 1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐与乙酸乙酯的体积和与1,4-二氧六环的体积比为2:3~3:2，缓冲溶液的体积分数为12~18%。

2.根据权利要求1所述的一种β-葡萄糖苷酶交联聚集体催化合成红景天苷的工艺，其特征在于：步骤（1）中沉降剂为1,4-二氧六环，1,4-二氧六环与β-葡萄糖苷酶液体积比为1.7:1~2.2:1，β-葡萄糖苷酶液含β-葡萄糖苷酶1.5~2.5mg/ml；步骤（2）中戊二醛的终浓度为38~43mM，交联时间为8~12min；步骤（3）中硼氢化钠的终浓度为20~25 mM；β-葡萄糖苷酶交联聚集体制备阶段整个反应过程的反应温度控制在4~6℃，pH 为5.0~5.5。

3.根据权利要求1所述一种β-葡萄糖苷酶交联聚集体催化合成红景天苷的工艺，其特征在于：红景天苷合成阶段的步骤（4）中乙酸乙酯与1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐体积比为50%~80%。