[发明专利]一种水黄皮耐逆相关基因MpSRG及其编码的蛋白与应用

说明书

技术领域

本发明涉及植物基因工程领域，尤其涉及一种水黄皮耐逆相关基因MpSRG及其编码的蛋白质与应用。

背景技术

盐碱、干旱等非生物胁迫影响着农作物的生长发育，严重时甚至导致作物死亡。为了提高农作物产量，培育耐逆性作物品种是主要的应对方法之一。目前，通过基因工程的方法育种已经成为培育耐逆性作物的重要方法之一。高等植物可以通过多种途径来应对环境中的这些不利因素。随着测序技术的发展，尤其是转录组测序技术的广泛应用，人们在植物体内发现了很多功能未知的基因可能参与了植物耐逆调控。这些新的基因功能未知，有些也没有发现保守结构域，对其所发挥的机理也知之甚少。人们从苜蓿、鹰嘴豆、沙冬青和大豆等不同豆科植物中克隆到了许多功能未知的基因，然而还未从水黄皮中克隆到与非生物逆境相关的基因。

水黄皮为典型的半红树植物，既能生长于海岸或沿河的滩涂地区，又可在远离海边的陆地上生长，对土壤盐度表现出广泛的适应性，因而是研究植物耐逆性的良好材料。同时，作为豆科植物，水黄皮的基因资源将可通过转基因技术应用于大豆或其它农作物的品种改良。

发明内容

本发明的目的在于提供一种水黄皮耐逆相关基因MpSRG，其碱基序列如SEQ ID NO：1所示。在本发明中，所述水黄皮耐逆相关基因MpSRG的具体碱基序列长度为402bp，如SEQ ID NO：1所示：

在本发明中，将SEQ ID NO：1所示的基因序列命名为MpSRG。

本发明的第二个目的在于提供一种水黄皮耐逆相关基因MpSRG编码的蛋白质，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。在本发明中，水黄皮耐逆相关基因MpSRG编码的蛋白质的具体长度为133aa，如SEQ ID NO：2所示：

本发明的第三个目的在于提供一种含有所述水黄皮耐逆相关基因MpSRG的重组载体。

所述重组载体为重组植物表达载体。所述重组载体可以通过将上述水黄皮耐逆相关基因MpSRG插入到克隆载体或表达载体而得到。

适于构建本发明所述重组载体的克隆载体包括但不限于，例如pMD18-T、pMD19-T、pMD20-T、pMD19-T Simple Vecter、pUC18、pUC19、pUC118、pUC119等。

适于构建本发明所述的表达载体包括但不限于，例如：pBI121、p13W4、pGEM等。

重组植物表达载体包括但不限于双元农杆菌表达载体、可用于植物微弹轰击的载体等。所述植物表达载体还可包含外源基因的3’端非翻译区域，即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段。所述聚腺苷酸信号可引导聚腺苷酸加入到mRNA前体的3’端，如农杆菌冠瘿瘤诱导(Ti)质粒基因(如胭脂合成酶Nos基因)、植物基因（如大豆贮存蛋白基因）3’端转录的非翻译区均具有类似功能。

使用MpSRG构建重组植物表达载体时，在其转录起始核苷酸前可加上任何一种组成型启动子，如花椰菜花叶病毒（CAMV）35S启动子、玉米的泛素启动子（Ubiquitin），它们可单独使用或与其它植物启动子结合使用；此外，使用本发明的基因构建植物表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。

为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用植物表达载体进行加工，如加入可在植物中表达的编码可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因（GUS基因、萤光素酶基因等）、具有抗性的抗生素标记物（庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等）或是抗化学试剂标记基因（如抗除莠剂基因）等。从转基因植物的安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以逆境筛选转化植株。

本发明的第四个目的在于提供含有本发明所述重组载体的重组细胞。所述重组细胞可以通过将含有水黄皮耐逆相关基因MpSRG的重组载体转化至宿主细胞而得到。

适于构建本发明所述重组细胞的宿主细胞包括但不限于，例如：根癌农杆菌细胞LBA4404、EHA105、GV3101等。

在本发明的一个实施方案中，所述重组细胞为根癌农杆菌细胞LBA4404-MpSRG。