[发明专利]一种采用低渗透压收获液收获病毒的方法有效
申请号: | 201310363119.0 | 申请日: | 2013-08-16 |
公开(公告)号: | CN103602639A | 公开(公告)日: | 2014-02-26 |
发明(设计)人: | 黄金凤;张嵬;于巍;孟凡红;何玉君;谷业新;高强;尹卫东 | 申请(专利权)人: | 科兴(大连)疫苗技术有限公司 |
主分类号: | C12N7/02 | 分类号: | C12N7/02;A61K39/25;A61K39/15;A61K39/125;A61K39/29;A61P31/14;A61P31/22;C12R1/93 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞 |
地址: | 116620 辽宁省大*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 采用 渗透压 收获 病毒 方法 | ||
1.一种用于破碎细胞收获病毒的低渗透压收获液,其特征在于,该低渗收获液的渗透压为0~150mOsmol/kg。
2.根据权利要求1所述的低渗透压收获液,其特征在于,含有磷酸二氢盐和磷酸氢二盐或在此基础上添加的氯化钠和/或蔗糖。
3.根据权利要求2所述的低渗透压收获液,其特征在于,含有如下组分:0.0026%-0.052%的磷酸二氢盐、0.029%-0.58%的磷酸氢二盐、0-0.34%的氯化钠和0-1%的蔗糖,前述%均为质量体积比,单位为g/ml。
4.根据权利要求2所述的低渗透压收获液,其特征在于,含有如下组分:0.0052%-0.026%的磷酸二氢盐,0.058%-0.290%的磷酸氢二盐,0-0.170%的氯化钠和0-1%的蔗糖;前述%均为质量体积比,单位为g/ml。
5.根据权利要求2所述的低渗透压收获液,其特征在于,含有如下组分:0.026%的磷酸二氢盐,0.290%的磷酸氢二盐,0%的氯化钠和0%的蔗糖,前述%均为质量体积比,单位为g/ml。
6.根据权利要求1所述的低渗透压收获液,其特征在于,为稀释后的细胞培养基或细胞缓冲液PBS。
7.根据权利要求6所述的低渗透压收获液,其特征在于,所述细胞培养基为MEM培养基、199培养基或无酚红培养基。
8.一种采用低渗透压收获液收获病毒的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)在病毒培养环境中,当细胞出现病变CPE程度大于50%时,弃去细胞培养液,加入权利要求1-7任一所述的低渗透压收获液,室温静置5-30min;
(2)显微镜下观察细胞状态,待细胞发生明显膨胀时震摇使细胞脱落,收集病毒液。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述的病毒为胞内病毒。
10.权利要求1-7任一所述的低渗透压收获液在制备用于预防或治疗水痘病毒、轮状病毒、EV71病毒、CA16病毒或甲肝病毒所致疾病的疫苗或药物中的应用。
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