[发明专利]藏茵陈药材中獐牙菜醇苷化学对照品的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种化学对照品的制备方法，尤其涉及藏茵陈药材中獐牙菜醇苷化学对照品的制备方法。

背景技术

藏茵陈为治疗肝炎、胆囊炎及利胆退黄等肝胆系统疾病的一类著名藏药材，其主要活性成分为环烯醚萜类和口山酮类化合物，口山酮类化学物具有中枢神经系统兴奋和抑制、利尿、强心等作用及解肝毒、保肝、抗炎、抗病毒等活性。7-O-[α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖]-1,8-二羟基-3-甲氧基口山酮（7-O-[α-L- rhamnopyranosyl-(1→2)-β-D-xylopyranosyl]-1,8- dihydroxy-3-methoxyxanthone）或被命名为獐牙菜醇苷（Swertioside），是藏茵陈药材中一种口山酮苷类成分，为藏茵陈治疗肝炎的活性成分之一，其化学结构如下：

目前报道的獐牙菜醇苷的制备方法主要采用柱层析法，尚无有关獐牙菜醇苷制备方法的公开专利。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种工艺简单、重复性高、回收率高的藏茵陈药材中獐牙菜醇苷化学对照品的制备方法。

为解决上述问题，本发明所述的藏茵陈药材中獐牙菜醇苷化学对照品的制备方法，包括以下步骤：

⑴制备提取物浸膏：

将藏茵陈药材以1 g：5 mL ~30 mL的比例用体积浓度为5~95%的乙醇或体积浓度为5~100%的甲醇在提取温度为60~95℃、提取次数1~4次、每次1~4 h的条件下进行加热回流提取，合并提取液；所述提取液在压力为0.02~0.07MPa条件下经减压浓缩后得到藏茵陈提取物浸膏； 

⑵萃取：

将所述藏茵陈提取物浸膏用其质量的1~10倍去离子水溶解后，依次用氯仿、正丁醇进行萃取，分别得到氯仿部位、正丁醇部位和水部位；

⑶所述正丁醇部位干燥至恒重后，得到正丁醇部位干燥粉末；

⑷分离制备富含獐牙菜醇苷的馏分：

将所述正丁醇部位干燥粉末用其质量的1~10倍的体积浓度为5~100%的甲醇或体积浓度为5~95%的乙醇溶解，然后注入到制备型高效液相色谱中，依次用体积浓度为60%的甲醇溶液及体积浓度为70~100%的甲醇溶液进行洗脱，并采用200 nm~400 nm的检测波长进行在线紫外检测，收集体积浓度为70~100%的甲醇溶液中含有的獐牙菜醇苷的洗脱液A；所述洗脱液A在压力为0.02~0.07MPa条件下经浓缩干燥至恒重后得到富含獐牙菜醇苷的馏分，此时化学物纯度>80%；

⑸纯化：

将所述富含獐牙菜醇苷的馏分用其质量的1~10倍的体积浓度为100%的甲醇溶解后，上样到凝胶分离柱中，并采用体积浓度为100%的甲醇溶液进行洗脱，得到洗脱液B；该洗脱液B在压力为0.02~0.07MPa条件下经浓缩干燥至恒重后得到纯度>98%的富含獐牙菜醇苷的馏分，即得獐牙菜醇苷化学对照品。

所述步骤⑴中藏茵陈药材是指川西獐牙菜或抱茎獐牙菜。

所述步骤⑶中的干燥是指冷冻干燥、喷雾干燥、烘箱干燥中的一种。

所述冷冻干燥的条件是指冷肼温度为-20~-50℃，真空度为20Pa~50 Pa。

所述喷雾干燥的条件是指入料流量为200~1000 mL/h，入料温度为30~70℃，进风温度为170~210℃，进风量为16~28 m³/h。

所述烘箱干燥的温度为40~70℃。

所述步骤⑷中的洗脱条件是指洗脱流速为60 mL/min~200 mL/min，洗脱体积为色谱柱体积2~10倍。

所述步骤⑷中的制备型高效液相柱为市售产品，且其填料为C₈或C₁₈键合相填料，填料粒径为5~20um。

所述步骤⑸中的洗脱条件是指洗脱流速为0.2 mL/min~5 mL/min，洗脱体积是色谱柱体积2~10倍。

所述步骤⑸凝胶分离柱中的凝胶填料为Sephadex LH-20。

本发明与现有技术相比具有以下优点：

1、由于本发明采用制备高效液相与凝胶色谱相结合的分离纯化技术手段，获得纯度大于98%的獐牙菜醇苷，具有所用试剂量少、操作简单方便、回收率高，精密度高、稳定性好、重复性等特点，因此，适宜产业化生产。

2、由于本发明采用制备型高效液相色谱为分离手段，在保证高效分离的前提下，提高了獐牙菜醇苷化学品产量，可以获得克级纯度在98%以上的化学对照品。