[发明专利]包埋脂溶性维生素的玉米肽糖基化产物纳米颗粒的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于农副产品深加工及食品工业技术领域，涉及一种包埋脂溶性维生素的玉米肽糖基化纳米颗粒的制备，可作为配料应用于乳制品及饮料中。

背景技术

脂溶性维生素是人类必需的营养物质，其难溶于水而易溶于有机溶剂。维生素E、维生素D均属于脂溶性维生素，由于水溶性差，它们在食品工业的应用受到了限制。

近年来，包埋疏水活性物质的微胶囊技术越来越受到人们的关注。玉米醇溶蛋白具有特殊溶解性以及自组装形成纳米球形颗粒的特点。同时，作为天然的生物大分子，玉米醇溶蛋白具有良好的生物相容性和生物可降解性。因此，目前国内外有大量研究以玉米醇溶蛋白作为疏水活性物质的载体，采用的包埋方法为反溶剂法。

中国发明专利申请CN102783693A和CN101785867A分别公开了玉米醇溶蛋白纳米颗粒的制备方法。按照这些专利方法得到的玉米醇溶蛋白纳米颗粒，虽然可以在一定程度上提高玉米醇溶蛋白的溶解性，然而玉米醇溶蛋白的溶解需要大量使用有机溶剂，容易造成有机溶剂残留。此外，蛋白纳米颗粒的粒度大于150nm，不利用人体细胞的吸收。因此，我们使用玉米醇溶蛋白的改性产物作为载体，不仅解决了上述问题，还对于研究和开发新型食品基料、改善食品的加工特性开辟了一条新的途径。本专利以玉米肽糖基化产物为例。

玉米肽是指玉米醇溶蛋白经蛋白酶作用后，再经分离、精制等过程得到的蛋白质的水解产物。它改善了玉米醇溶蛋白的水不溶性，在酸性条件下不易凝聚，具有较强的乳化性。此外，肽和多糖通过接枝形成的共聚物具有优越的乳化特性、溶解性和热稳定性，抗氧化作用。目前，关于玉米肽糖基化产物在包埋脂溶性维生素的应用还未见相关专利和报道。

发明内容

为了解决上述现有技术的不足之处，本发明的目的在于提供一种包埋脂溶性维生素的玉米肽糖基化产物纳米颗粒的制备方法；该方法既能保持脂溶性维生素固有的性质，又克服了其不溶于水、生物利用率低的缺点。

本发明的另一目的在于提供上述方法制备的高品质（包埋率高、粒度小、溶解性好、稳定性高）的玉米肽糖基化产物纳米颗粒。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种包埋脂溶性维生素的玉米肽糖基化产物纳米颗粒的制备方法，包括如下步骤和工艺条件：

（1）将玉米肽和多糖分别溶于10～20mM磷酸盐缓冲液，搅拌均匀；所述多糖为麦芽糊精；控制玉米肽溶液和多糖溶液的浓度均为50～100mg/mL；

（2）将玉米肽溶液和多糖溶液混合，调节pH值至7.4～7.6，搅拌均匀，然后冷冻干燥；

（3）将步骤（2）所得的干燥粉末放于密闭干燥器中，在温度为55～65℃条件下进行干热反应4～7天；

（4）将步骤（3）所得的固体溶解于去离子水中，搅拌均匀，离心，取上清，冷冻干燥，干燥的粉末存放在冰箱中，得到玉米肽糖基化产物；

（5）将步骤（4）所得的糖基化产物溶解于去离子水中，控制溶液中肽浓度为0.5～5mg/mL，搅拌均匀，调节pH至7～3；

（6）将脂溶性维生素溶解于无水乙醇中，控制浓度为1～10mg/mL，搅拌均匀；

（7）将步骤（6）所得脂溶性维生素乙醇溶液滴加至步骤（5）所得溶液中，搅拌1～2h；所得溶液中脂溶性维生素与玉米肽的质量比为1:10～1:50；

（8）将步骤（7）所得的溶液旋转蒸发后，放置在冰箱或冷冻干燥密封保存，得到包埋脂溶性维生素的玉米肽糖基化产物纳米颗粒。

优选地，所述脂溶性维生素为维生素E或维生素D。所述的磷酸盐缓冲液为磷酸二氢钠‐磷酸氢二钠缓冲液，pH值为7.5。所述的干热反应的相对湿度为79%。所述离心为10000r/min条件下离心15min。步骤（2）和（5）所述的pH通过用0.1mol/L盐酸或氢氧化钠进行控制。所述的旋转蒸发温度为45～55℃，真空度0.1MPa，时间5～10min。所述的冰箱的温度为3～6℃。

本发明采用反溶剂法制备复合纳米颗粒。当脂溶性维生素乙醇溶液加到玉米肽糖基化产物水溶液中，由于疏水相互作用，脂溶性维生素与玉米肽相互聚集，形成纳米颗粒，同时将脂溶性维生素包埋其中。此时，糖基化产物的糖链形成亲水外壳，从而获得粒径较小、溶解性好、稳定性高的复合纳米颗粒。

相对于现有技术，本发明具有如下优点和有益效果：