[发明专利]冬虫夏草的HPLC特征图谱及其建立方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及中药检测领域，特别涉及冬虫夏草的HPLC特征图谱，其建立方法以及所述HPLC特征图谱在冬虫夏草药材及其制品检测中的应用。

背景技术

冬虫夏草为麦角菌科虫草属真菌冬虫夏草菌Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫蝙蝠蛾(Hepialusarmori canusoberthur)越冬幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，为我国特有珍稀名贵中药材。该药具有益精髓，补虚损，保肺，益肾，止血，化痰等功效，主要用于久咳虚喘，劳嗽咯血，阳痿遗精，腰膝酸痛等症。现代药理和临床研究结果表明，冬虫夏草具有镇强心、降血脂、降低胆固醇、调节机体免疫功能、抗肿瘤等多种药理活性，对高血压、冠心病、慢性肝炎、慢性肾炎、支气管炎以及食道癌、肝癌、自身免疫性疾病等均有较好疗效。

由于冬虫夏草的稀缺性，冬虫夏草价格昂贵，以假乱真的现象屡见不鲜，尤其是以冬虫夏草为原料的制品，无法监控是否是使用了冬虫夏草投料，或者是使用了替代品(蛹虫草等)投料。

冬虫夏草收载于中国药典2010年版一部，主要通过性状鉴别、检测腺苷的含量来控制质量，而腺苷并不是冬虫夏草的特有成份，对其成分的检测并不能真正反映药材的质量。因此，目前存在对于能够全面表征冬虫夏草的成分特征的HPLC特征图谱的需求，冬虫夏草制品的质量控制方法和质量控制标准有待于进一步完善。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的一个目的是提供一种冬虫夏草的HPLC特征图谱。

本发明的另一个目的是提供一种用于检测含冬虫夏草的药物制剂的方法。

本发明的再一个目的是提供上述冬虫夏草HPLC特征图谱在冬虫夏草及其制品的鉴定、检测中的应用。

本发明的还一个目的是提供上述HPLC特征图谱的建立方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的。

一方面，本发明提供了一种冬虫夏草的HPLC特征图谱，其中，所述HPLC特征图谱包括5个特征峰，以5号峰腺苷峰为参照峰，各特征峰的相对保留时间和相对标准偏差为：

1号峰：相对保留时间0.12±0.0012，相对标准偏差为0.14%；

2号峰：相对保留时间0.36±0.0036，相对标准偏差为0.28%；

3号峰：相对保留时间0.61±0.0061，相对标准偏差为0.34%；

4号峰：相对保留时间0.63±0.0063，相对标准偏差为0.22%；

5号峰：相对保留时间1.00，相对标准偏差为0.17%。

另一方面，本发明提供一种用于检测含冬虫夏草的药物制剂的方法，所述方法包括以下步骤：

1）使用HPLC法得到待检测药物制剂的HPLC特征图谱；并使用腺苷峰为参照峰，计算各色谱峰的相对保留时间；

2）将步骤1）得到的相对保留时间与上述冬虫夏草HPLC特征图谱中特征峰相对保留时间比较；

3）将步骤1）得到的相对保留时间与蛹虫草HPLC特征图谱的特征峰相对保留时间比较；优选地，所述蛹虫草HPLC特征图谱包括6个特征峰，以峰d所代表的腺苷峰为参照峰，各特征峰的相对保留时间和相对标准偏差为：

峰a：相对保留时间0.11±0.0011，相对标准偏差为0.11%;

峰b：相对保留时间0.36±0.0036，相对标准偏差为0.28%；

峰c：相对保留时间0.63±0.0063，相对标准偏差为0.22%;

峰d：相对保留时间1.00，相对标准偏差为0.17%;

峰e：相对保留时间1.14±0.0114，相对标准偏差为0.06%；

峰f：相对保留时间1.26±0.0126，相对标准偏差为0.01%；

4）根据步骤2）和步骤3）的比较结果判断所述冬虫夏草的药物制剂中是否含有冬虫夏草，使用蛹虫草代替冬虫夏草或者为冬虫夏草与蛹虫草的混合物。

另一方面，本发明提供了上述冬虫夏草HPLC特征图谱或蛹虫草HPLC特征图谱的建立方法，该方法包括以下步骤：

（1）制备冬虫夏草溶液或蛹虫草溶液，以及腺苷对照品溶液；

（2）将步骤（1）所得冬虫夏草溶液或蛹虫草溶液，以及腺苷对照品溶液分别进行高效液相色谱分析，得到冬虫夏草或蛹虫草，以及腺苷的HPLC特征图谱；

（3）通过比较不同冬虫夏草的HPLC特征图谱确定冬虫夏草的共有特征峰，或通过比较不同蛹虫草的HPLC特征图谱确定蛹虫草的共有特征峰。