[发明专利]离子色谱质谱联用仪定性定量测定食品中糖醇的方法

说明书

技术领域

本发明涉及食品领域检测分析领域，尤其是对食品中的糖醇成分的分析方法。

背景技术

在检验检疫部门，需要对食品的糖醇含量进行定性定量检测，但是目前的检测方法都有所缺陷。目前国内外对食品中糖醇的检测方法包括：高效液相色谱-蒸发光散射法、高效液相色谱-示差折光检测法、离子排斥液相色谱法、气相色谱法、气相色谱质谱法、液相色谱串联质谱法等。蒸发光散射法、示差折光检测法、离子排斥液相色谱法、气相色谱法等都无法满足欧盟657指令的要求。这些检测方法的阳性结果必须再用其他的分离柱、检测器予以确认才行。条件气相色谱质谱法中采用的方法，需要将样品衍生后再氮吹复溶，然后进样，耗时较长。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种检测食品中糖醇的的检测方法，其可以快速、定性、定量的对糖醇成分进行定量定性检测。

为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案离子色谱质谱联用仪定性定量测定食品中糖醇的方法，其包括如下步骤：1），样品前处理，含蛋白、油脂的样品经乙腈沉淀以及冷冻离心后定容；其他固体样品，研磨后定容再经冷冻离心处理；果汁、味淋、蜂蜜类液体样品直接定容，将定容后的样品过水相膜和SPE柱，滤液供检测；

2)离子色谱质谱联用仪进行检测，其中，离子色谱条件，分离柱淋洗液为90mmoL/L的氢氧化钠溶液进行等度洗脱，流速为0.50 mL / min；采用抑制电导法，抑制器电流为139mA，进样量为25.0μL，抑制器水源用恒流泵流速1.0 mL / min；

3)质谱条件，离子化模式为APCI-，晕针温度450℃；雾化气为氮气， 纯度为99.9%、压力为55 psi；

4)定性定量分析，对样品根据保留时间及糖醇特征分子离子质荷比进行糖醇分子定性分析，通过外标法利用标准法绘制标准曲线进行定量分析。

在所述步骤1）样品前处理中，含蛋白、油脂的样品，取0.1～1g样品于50mL离心管中，加25mL水涡旋混合3 min，超声提取10min；取5mL上清液于10mL离心管中，加5mL正己烷涡旋混合,以5000 rpm离心10min,去除正己烷层，下层取2mL于另一离心管中，加3mL乙腈涡旋，5000 rpm，温度零下15℃冷冻离心15min，取上清液1.5mL，于另一试管中，氮气吹干后加3.5mL去离子水溶解涡旋，过水相膜和SPE柱，滤液供检测；果汁、蜂蜜、味淋,取0.1～1g样品于100mL容量瓶中加水定容，过水相膜和SPE柱，滤液供检测；其他固体样品，取0.1～1g样品加少量水充分研磨后转移至100mL容量瓶中加去离子水定容至刻度，吸10mL溶液，在5000 rpm，温度零下15℃下冷冻离心15min，取5mL上清液过水相膜和SPE柱，滤液供检测。

所述SPE柱的交换填料由混合型离子交换填料和C18填料按照质量比1:1的比例依次分布在SPE柱内组成。

所述混合型离子交换填料由阳离子交换填料和阴离子交换填料按照质量比1:1的比例混合组成。

所述阳离子交换填料为表面修饰有季铵盐的甲基丙烯酸环氧丙酯；所述阴离子交换填料为表面修饰有磺酸盐的甲基丙烯酸环氧丙酯。

所述SPE柱在使用前，在负压的条件下加5mL甲醇于柱端，以3mL/ min的流速过柱清洗杂质；加入50%的甲醇5mL于柱端，以3mL/ min的流速过柱进行活化处理。

建立了离子色谱质谱联用检测食品中糖醇的方法。样品中的糖醇采用不同的方法提取，过SPE柱去除杂质。提取液经分离柱分离，在选择离子监测(SIM)模式下进行检测,外标法定量。各目标物在一定范围内线性关系良好,相关系数（R²）均大于0.99。赤藓糖醇、木糖醇、D-山梨糖醇、D-甘露糖醇、乳糖醇、麦芽糖醇的定量限 (信噪比S / N=10) 分别为0.98 mg/kg、1.99 mg/kg、2.24 mg/kg、5.92 mg/kg、13.56 mg/kg、13.21 mg/kg；检出限(S / N=3)分别为0.28 mg/kg、0.59 mg/kg 、0.71 mg/kg 、1.74mg/kg 、4.14 mg/kg、4.03 mg/kg。6种糖醇的加标回收率为84.5% ~105.5%，相对标准偏差(RSDs)为1.5% ~7.6% 。