[发明专利]一种大黄药材的指纹图谱的鉴别方法

权利要求书

1.大黄药材的指纹图谱鉴别方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）供试品溶液的制备：取大黄药材粉末0.5～2g，过30～50目筛，加水20～40ml浸泡20～40分钟，加热回流20～40分钟，提取液3000～5000rpm离心5～15min，滤过，取滤液5～15ml，加入80%～95%乙醇20～40ml，2～5℃静置一夜，吸取上清液0.5～5ml，50～70℃空气吹干，加水1～5ml溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液，备用；

（2）指纹图谱测定：取供试品溶液适量，注入高效液相色谱仪，记录75分钟以内的色谱图，得到由其共有特征峰构成的大黄药材对照高效液相指纹图谱；其中高效液相色谱分析的条件如下：用十八烷基键合硅胶为填充剂；Agilent Zorbax Eclipse XDB C18色谱柱4.6×250mm；乙腈-0.01-2%冰醋酸为流动相梯度洗脱，梯度程序为：0min→5min→30min→45min→60min→62min→75min：对应流动相：乙腈：2%→7%→15%→20%→35%→50%→50%；0.01-2%冰醋酸：98%→93%→85%→80%→65%→50%→50%，检测波长为200nm-400nm；流速为0.2ml/min-2ml/min；柱温为20℃-50℃；所得到的大黄药材的对照指纹图谱有9个共有特征峰，其相对保留时间分别为：1号峰：0.13，2号峰：0.34，3号峰：0.66 ，4号峰：0.67，5号峰：0.79，6号峰：0.89，7号峰：0.99，8号峰（S）：1.00，9 号峰：1.15。

2.根据权利要求1所述的大黄药材的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：大黄药材粉末过40目筛，加水30ml浸泡30分钟，加热回流30分钟，提取液4000rpm离心10min，滤过，取滤液10ml，加入95%乙醇28ml，4℃静置一夜，吸取上清液2ml，60℃空气吹干，加水2ml溶解，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液。

3.根据权利要求1所述的大黄药材的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：其中所述的检测波长为280nm；流速为0.9ml/min；柱温为25℃。

4.根据权利要求1所述的大黄药材的指纹图谱鉴别方法，其特征在于：其中的流动相乙腈-0.01-2%冰醋酸用乙腈-0.03%磷酸溶液或乙腈-0.03%甲酸溶液代替。